BD، 561951، BD Pharmingen™ PE-Cy™5 مضاد CD8 الفأري البشري

الاسم البديل: CD8α؛ CD8A؛ CD8 ألفا؛ Leu2؛ MAL؛ T8؛ p32
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، قرد الريسوس، قرد المكاك، قرد البابون (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: CD8a البشري
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 20 ميكرولتر
رقم الورشة: IV T171؛ الخامس T-CD08.03؛ السادس 6T-CD8.1، 6T-081
RRID: AB_395771
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ PE-Cy5 (المعروف سابقًا باسم BD Cy-Chrome™) في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-Cy5 الحر.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. PE-Cy5 هو فلوروكروم مزدوج يتكون من R-phycoerythrin (PE)، الذي يتم إثارته بواسطة ضوء 488 نانومتر من ليزر أيون الأرجون ويعمل كمانح للطاقة، مقترنًا بصبغة السيانين Cy5، التي تعمل كمستقبل للطاقة وتتألق عند 670 نانومتر. قامت شركة BD Biosciences Pharmingen بتحسين نقل طاقة الفلوركروم في PE-Cy5 إلى أقصى حد، مما أدى إلى زيادة شدة انبعاث الفلورة، وتقليل الانبعاث المتبقي من PE، وتقليل التباين بين الدفعات. تم تحسين PE-Cy5 للاستخدام مع ليزر أيون الأرجون الأحادي الذي ينبعث منه ضوء بطول موجي 488 نانومتر. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع لفلوروكروم PE-Cy5 المزدوج، يجب توخي الحذر عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي ثنائية الليزر التي قد تُثير كلاً من PE وCy5™ بشكل مباشر. وقد أشارت التقارير إلى أن فلوروكروم PE-Cy5 المزدوج يرتبط ببعض أنواع الخلايا البلعمية والخلايا المحببة البشرية عبر مستقبلات Fc، كما أشارت التقارير إلى أن PE يرتبط بالخلايا اللمفاوية البائية للفئران عبر مستقبلات Fc أيضًا. يمكن أن يقلل تحضين كريات الدم البيضاء للفئران مسبقًا باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة 2.4G2 المضاد لـ CD16/CD32 في الفئران، والمُنقّى بواسطة Mouse BD Fc Block™، من الارتباط غير النوعي للكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 بخلايا B في الفئران. مع ذلك، لا يُنصح باستخدام الكواشف المُقترنة بـ PE-Cy5 لتلوين خلايا الطحال في فئران SJL وNOD وMRL، حيث أُبلغ عن تلوين غير نوعي للخلايا اللمفاوية B و/أو كريات الدم البيضاء الأخرى بغض النظر عن استخدام Mouse BD Fc Block™ (يُعتقد أن مُركب CD72c مسؤول عن ارتباط PE-Cy5 في هذه السلالات). يمكن استخدام الكواشف المُقترنة بـ PE وPerCP وPerCP-Cy5.5 وAPC وAPC-Cy7 على كريات الدم البيضاء من هذه السلالات من الفئران. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع، الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج، قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة في أي مركب فلوري مزدوج؛ لذا، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المرتبطة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بها، لإضاءة الغرفة. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. Cy هي علامة تجارية مسجلة لشركة GE Healthcare. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources.