BD، 562047، BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Human IL-4

التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1 للفئران
المستضد: إنترلوكين-4 بشري مُعاد التركيب مُنقّى
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
التركيز: 0.5 ملغم/مل
RRID: AB_395423
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ FITC في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة FITC غير المتفاعل. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: التلوين المناعي الفلوري وتحليل التدفق الخلوي: يمكن استخدام الجسم المضاد MP4-25D2 المرتبط بـ FITC للتلوين المناعي الفلوري متعدد الألوان وتحليل التدفق الخلوي لتحديد وحصر الخلايا المنتجة لـ IL-4 ضمن مجموعات الخلايا المختلطة (انظر الصورة، اللوحة اليسرى). وللحصول على أفضل تلوين مناعي فلوري لتحليل التدفق الخلوي، يجب معايرة هذا الجسم المضاد (≤ 0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة/مليون خلية). يُعدّ ما يلي عنصر تحكم مفيدًا لإثبات خصوصية التلوين: حجب الخلايا المثبتة/المنفذة مسبقًا باستخدام الجسم المضاد MP4-25D2 غير الموسوم (رقم المنتج 554482) قبل التلوين. وقد وصف كلٌّ من سي. بروسين ودي. ميتكالف تقنية تلوين السيتوكينات داخل الخلايا واستخدام عناصر التحكم الحاجبة بالتفصيل. يُعدّ الغلوبولين المناعي FITC-R3-34 (رقم المنتج 554684) من نوع IgG1 المُستخلص من الفئران، والمُستخدم كعنصر تحكم مناسب لتقييم مستوى التلوين الخلفي على الخلايا البشرية المُثبّتة بالبارافورمالديهايد والمُنفذة بالصابونين. يُستخدم بتراكيز مُقاربة لتركيز الجسم المضاد المطلوب (مثلاً، ≤ 0.5 ميكروغرام من الجسم المضاد أحادي النسيلة لكل مليون خلية). للاطلاع على المنهجية التفصيلية، يُرجى زيارة موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com، والاطلاع على قسم البروتوكولات أو فصل التلوين داخل الخلايا في دليل وظائف المناعة. الكشف بتقنية ELISA: يُعدّ الجسم المضاد MP4-25D2 المُؤشّر بالبيوتين (رقم المنتج 554483) مفيدًا كجسم مضاد للكشف في اختبار ELISA الساندويتش الذي يقيس مستويات بروتين IL-4 البشري. يمكن استخدام الجسم المضاد MP4-25D2 المُؤشَّر بالبيوتين مع الجسم المضاد 8D4-8 المُنقَّى (رقم المنتج 554515) كجسم مضاد مُثبِّت، مع بروتين IL-4 البشري المُعاد تركيبه (رقم المنتج 554605) كمعيار. لتحليل IL-4 في المصل أو البلازما، يُوصى باستخدام مجموعة BD OptEIA™ Human IL-4 ELISA (رقم المنتج 555194) أو مجموعة BD OptEIA™ Human IL-4 ELISA (رقم المنتج 550614). التحييد: أُفيد بأن صيغة NA/LE من الجسم المضاد MP4-25D2 (رقم المنتج 554481) مفيدة لتحييد النشاط الحيوي لبروتين IL-4 البشري. يُعد الجسم المضاد R3-34، رقم الكتالوج 554683، عنصر تحكم مناسب من نوع IgG1 للفئران NA/LE™ لمطابقة الجسم المضاد NA/LE™ MP4-25D2.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. يُرجى الرجوع إلى www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي.