BD، 562260، BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human LAP

الاسم البديل: الببتيد المرتبط بالكمون؛ TGFB1؛ TGFbeta؛ عامل النمو المحول بيتا
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
المستضد: TGF-β1 البشري
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)، قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره أثناء التطوير)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_10895568
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: إجراءات الفحص الموصى بها، إجراءات التلوين المقترحة للأجسام المضادة للفأر PE المضادة لبروتين LAP البشري: 1. جمع الخلايا الليمفاوية المحيطية أحادية النواة (PBMCs) بعد تحفيزها (لمدة 24 ساعة) باستخدام الأجسام المضادة للفأر NA/LE النقية المضادة لبروتين CD3 البشري (رقم المنتج 555329) والأجسام المضادة للفأر NA/LE النقية المضادة لبروتين CD28 البشري (رقم المنتج 555725). 2. غسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين (مثل محلول التلوين BD Pharmingen™ (FBS)، رقم المنتج 554656). 3. قم بتلوين 1 × 10^6 خلية باستخدام جسم مضاد PerCP Mouse anti-Human CD4 (رقم المنتج 347324) وإما باستخدام جسم مضاد PE Mouse anti-Human LAP (رقم المنتج 562260) أو باستخدام جسم مضاد PE Mouse IgG1, κ Isotype control (رقم المنتج 555749) لمدة 30 دقيقة على الجليد، مع حمايتها من الضوء. 4. اغسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين. 5. قم بتلوين الخلايا باستخدام جسم مضاد Alexa Fluor® 488 Mouse anti-Human FoxP3، راجع ورقة البيانات الفنية لرقم المنتج 560047 للاطلاع على البروتوكول المفصل. باختصار، أ. أضف 2 مل من محلول FoxP3 buffer A بتركيز 1× إلى راسب الخلايا. ب. قم بالطرد المركزي وحضّن في 0.5 مل من محلول C لمدة 30 دقيقة. ج. اغسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين وقم بتلوينها باستخدام جسم مضاد anti-FoxP3 لمدة 30-45 دقيقة. د. اغسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين وقم بتحليلها باستخدام جهاز قياس التدفق الخلوي.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة. Alexa Fluor® هي علامة تجارية مسجلة لشركة Molecular Probes, Inc.، يوجين، أوريغون. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.