BD، 562490، BD Horizon™ PE-CF594 مضاد LAP الفأري البشري

الاسم البديل: الببتيد المرتبط بالكمون؛ TGFB1؛ TGFbeta؛ عامل النمو المحول بيتا
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
المستضد: TGF-β1 البشري
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)، قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره أثناء التطوير)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_2737626
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ BD Horizon™ PE-CF594 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-CF594 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: إجراءات الفحص الموصى بها، إجراءات التلوين المقترحة للأجسام المضادة BD Horizon™ PE-CF594 المضادة لبروتين LAP البشري: 1. جمع الخلايا الليمفاوية المحيطية أحادية النواة (PBMCs) بعد تحفيزها (لمدة 24 ساعة) باستخدام الأجسام المضادة النقية NA/LE المضادة لبروتين CD3 البشري (رقم المنتج 555329) والأجسام المضادة النقية NA/LE المضادة لبروتين CD28 البشري (رقم المنتج 555725) المرتبطة بالصفيحة. 2. غسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين [مثل محلول التلوين BD Pharmingen™ (FBS)، رقم المنتج 554656]. 3. قم بتلوين 1 × 10^6 خلية باستخدام PerCP-Cy™ 5.5 Mouse Anti-Human CD4 (رقم المنتج 341654) وأحد الأجسام المضادة التالية: BD Horizon™ PE-CF594 Mouse IgG1, κ Isotype Control (رقم المنتج 562292) أو BD Horizon™ PE-CF594 Mouse Anti-Human LAP antibody (رقم المنتج 562490) لمدة 30 دقيقة على الجليد، مع حمايتها من الضوء. 4. اغسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين. 5. قم بتلوين الخلايا للكشف عن FoxP3 داخل الخلايا باستخدام Alexa Fluor® 647 Mouse Anti-Human FoxP3 antibody؛ راجع بيانات المنتج الفنية (رقم المنتج 560889 أو 560045) للاطلاع على البروتوكول المفصل. باختصار، أ. أضف 2 مل من محلول FoxP3 buffer A بتركيز 1× إلى راسب الخلايا. ب. قم بالطرد المركزي وحضانتها في 0.5 مل من المحلول المنظم C لمدة 30 دقيقة. ج. اغسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين، ثم لونها باستخدام جسم مضاد فلوري مضاد لـ FoxP3 لمدة 30-45 دقيقة. د. اغسل الخلايا مرتين بمحلول التلوين، ثم حللها باستخدام قياس التدفق الخلوي.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: يمكن أن يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. قم بتخفيف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. تكساس ريد علامة تجارية مسجلة لشركة موليكولار بروبس، يوجين، أوريغون. سي إف علامة تجارية لشركة بيوتيوم. عند الإثارة بواسطة ليزر أصفر مخضر (561 نانومتر)، قد يكون التألق أكثر سطوعًا مما هو عليه عند الإثارة بواسطة ليزر أزرق (488 نانومتر). يُقدم هذا المنتج بموجب اتفاقية بين بيوتيوم وبي دي بيوساينسز. يخضع تصنيع هذا المنتج أو استخدامه أو بيعه أو عرضه للبيع أو استيراده لبراءة اختراع واحدة أو أكثر أو طلبات براءات اختراع قيد الانتظار مملوكة أو مرخصة لشركة بيوتيوم. يُسمح باستخدام هذا المنتج، وبالكمية التي اشتراها المشتري فقط، لأغراض البحث الداخلي الخاص بالمشتري، بما يتوافق مع كتيب المنتج المرفق. لا يُمنح بموجب هذا أي حق آخر في استخدام أو بيع أو نقل (أ) هذا المنتج أو (ب) مكوناته، سواء صراحةً أو ضمنًا أو بموجب مبدأ الإغلاق القضائي. هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط. تتطلب الاستخدامات التشخيصية ترخيصًا منفصلاً من شركة Biotium, Inc. للحصول على معلومات حول شراء ترخيص لهذا المنتج، بما في ذلك لأغراض أخرى غير البحث، يُرجى التواصل مع شركة Biotium, Inc.، 3159 Corporate Place, Hayward, CA 94545، هاتف: (510) 265-1027، فاكس: (510) 265-1352، بريد إلكتروني: btinfo@biotium.com. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع للفلوروكروم المزدوج، يجب توخي الحذر الشديد عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PE وCF™594 بشكل مباشر.