BD، 562586، BD Phosflow™ PE Mouse anti-Smad2 (pS465/pS467)/Smad3 (pS423/pS425)

الاسم البديل: SMAD2، SMAD3؛ MADH2، MADH3؛ MAD homolog 2، MAD homolog 3
التفاعل: الإنسان (اختبار مراقبة الجودة)، الفأر (تم اختباره أثناء التطوير)، الجرذ (متوقع)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: ببتيد Smad2 البشري المفسفر
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_11151915
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ R-PE في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط وPE الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: يُعد هذا المركب المضاد مناسبًا للتلوين داخل الخلايا لخطوط الخلايا اللمفاوية البشرية، وخلايا الدم أحادية النواة الطرفية، وخلايا الطحال الفأرية باستخدام محلول التثبيت BD Cytofix™ أو محلول التحلل/التثبيت BD Phosflow™ مع محلول النفاذية BD Phosflow™ Perm Buffer III (انظر الجدول أدناه). قبل التحفيز، تم تجويع الخلايا من المصل طوال الليل بكثافة تتراوح بين 2 و10 ملايين خلية/مل في أطباق زراعة الأنسجة ذات القاع المسطح (96 أو 6 آبار) أو في أنابيب ذات قاع مستدير وأغطية غير محكمة تحتوي على حوالي 100 ميكرولتر من الخلايا المعلقة. ملاحظة: 1. لم يكن تجويع الخلايا من المصل لمدة ساعتين بعد عزل خلايا الدم أحادية النواة الطرفية كافيًا لتقليل الفسفرة القاعدية لبروتيني Smad2 وSmad3. 2. لا تقم بخلط أو تحريك الخلايا غير المعالجة إلا قبل أن تصبح الخلايا جاهزة للتثبيت مباشرة، حيث أن تحريك خلايا الدم البيضاء الأولية للفئران أو البشر المحرومة من المصل قبل التثبيت يزيد من فسفرة Smad2/3، حتى في غياب TGF-β الخارجي.
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. للاطلاع على البروتوكولات الفنية، يُرجى زيارة www.bdbiosciences.com/us/s/resources. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية تقع في الولايات المتحدة.