BD، 562697، BD Phosflow™ PE-CF594 مضاد الفأر Smad2 (pS465/pS467)/Smad3 (pS423/pS425)

الاسم البديل: SMAD2، SMAD3؛ MADH2، MADH3؛ MAD homolog 2، MAD homolog 3
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، فأر (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: ببتيد Smad2 البشري المفسفر
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر
RRID: AB_2737728
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بـ BD Horizon™ PE-CF594 في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الجسم المضاد غير المرتبط و PE-CF594 الحر.
إجراءات الفحص الموصى بها: يُعد هذا الجسم المضاد الفلوري مناسبًا للتلوين داخل الخلايا لخطوط الخلايا اللمفاوية البشرية، وخلايا الدم أحادية النواة الطرفية، وخلايا الطحال الفأرية باستخدام محلول التثبيت BD Cytofix™ أو محلول التحلل/التثبيت BD Phosflow™ مع محلول النفاذية BD Phosflow™ Perm Buffer III (انظر الجدول أدناه). قبل التحفيز، تم تجويع الخلايا من المصل طوال الليل بكثافة 2-10 × 10^6 خلية/مل في أطباق زراعة الأنسجة ذات القاع المسطح (96 أو 6 آبار) أو في أنابيب ذات قاع مستدير غير محكمة الإغلاق تحتوي على حوالي 100 مل من الخلايا المعلقة. ملاحظة: 1. لم يكن تجويع الخلايا من المصل لمدة ساعتين بعد عزل خلايا الدم أحادية النواة الطرفية كافيًا لتقليل الفسفرة القاعدية لبروتيني Smad2 وSmad3. 2. لا تقم بخلط أو تحريك الخلايا غير المعالجة إلا قبل تثبيتها مباشرةً، حيث أن تحريك خلايا الدم البيضاء الأولية للفئران أو البشر المحرومة من المصل قبل التثبيت يزيد من فسفرة Smad2/3، حتى في غياب TGF-β الخارجي
ملاحظات المنتج: تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). يُرجى مراعاة الاحتياطات التالية: قد يؤدي امتصاص الضوء المرئي إلى تغيير كبير في نقل الطاقة الذي يحدث في أي مُقترن فلوري مزدوج؛ لذلك، نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لمنع تعريض الكواشف المُقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، لإضاءة الغرفة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد في الماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى الرجوع إلى صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. Texas Red هي علامة تجارية مسجلة لشركة Molecular Probes, Inc.، يوجين، أوريغون. CF™ هي علامة تجارية لشركة Biotium, Inc. عند إثارتها بواسطة ليزر أصفر-أخضر (561 نانومتر)، قد يكون التألق أكثر سطوعًا مما هو عليه عند إثارته بواسطة ليزر أزرق (488 نانومتر). يُقدَّم هذا المنتج بموجب اتفاقية بين شركتي BIOTIUM وBD Biosciences. يخضع تصنيع هذا المنتج أو استخدامه أو بيعه أو عرضه للبيع أو استيراده لبراءة اختراع واحدة أو أكثر أو طلبات براءات اختراع قيد الانتظار مملوكة أو مرخصة لشركة Biotium, Inc. يُسمح باستخدام هذا المنتج، وبالكمية التي اشتراها المشتري فقط، لأغراض البحث الداخلي الخاص بالمشتري، بما يتوافق مع كتيب المنتج المرفق. لا يُمنح أي حق آخر في استخدام أو بيع أو نقل (أ) هذا المنتج، أو (ب) مكوناته، صراحةً أو ضمنًا أو بموجب مبدأ الإغلاق القضائي. هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط. تتطلب الاستخدامات التشخيصية ترخيصًا منفصلاً من شركة Biotium, Inc. للحصول على معلومات حول شراء ترخيص لهذا المنتج، بما في ذلك لأغراض أخرى غير البحث، يُرجى التواصل مع شركة Biotium, Inc.، 3159 Corporate Place، Hayward، CA 94545، هاتف: (510) 265-1027، فاكس: (510) 265-1352، بريد إلكتروني: btinfo@biotium.com. نظرًا لطيف الامتصاص الواسع للفلوروكروم المزدوج، يجب توخي الحذر عند استخدام أجهزة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر، والتي قد تُثير كلاً من PE وCF™594 بشكل مباشر. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية (USDA) تقع في الولايات المتحدة. قد لا يكون التفاعل المتبادل بين الأنواع الذي تم اكتشافه أثناء تطوير المنتج قد تم تأكيده في جميع الأشكال و/أو التطبيقات. يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.