BD، 569991، جزيئات BD™ SpectraComp™ لفصل وتعويض المكونات

التفاعل: الفأر، الجرذ، الهامستر (تم اختباره أثناء التطوير)
التطبيق: قياس التدفق الخلوي (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم كل اختبار: قطرة واحدة/اختبار
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA و ≤0.09% أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيداً عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات الفحص الموصى بها: تم اختبار جزيئات BD™ SpectraComp™ لفصل وتعويض البروتينات باستخدام أجسام مضادة من نوع Ig للفئران والجرذان والهامستر، مرتبطة بصبغات فلورية مختلفة. راجع التعليمات المحددة أدناه حول استخدام جزيئات BD™ SpectraComp™ لفصل وتعويض البروتينات. 1. رجّ جزيئات BD™ SpectraComp™ لفصل وتعويض البروتينات جيدًا قبل الاستخدام. 2. أضف قطرة واحدة (حوالي 50 ميكرولتر) من جزيئات BD™ SpectraComp™ لفصل وتعويض البروتينات إلى قاع أنابيب قياس 12 × 75 مم أو آبار صفيحة 96 بئرًا لكل صبغة فلورية مستخدمة في التجربة. يُوصى بتضمين أنبوب واحد للتحكم غير المصبوغ. 3. أضف كاشف الأجسام المضادة إلى الخليط ورجّه جيدًا. حضّنه في درجة حرارة الغرفة لمدة 15-30 دقيقة، مع حمايته من الضوء. ملاحظات: • يُنصح بتحديد الكمية المناسبة من كاشف الأجسام المضادة مسبقًا بما يتناسب مع التطبيق. • عالج جزيئات BD™ SpectraComp™ لفصل وتعويض البروتينات بنفس البروتوكول المستخدم لعينة الخلايا، على سبيل المثال، إذا كان بروتوكول الاختبار يستخدم محلول BD Horizon™ Brilliant Stain Buffer أو خلايا مُنفذة ومثبتة، فيجب أيضًا معالجة الجزيئات بنفس الكواشف والبروتوكول. 4. أضف 2 مل من محلول التلوين [مثل BD Pharmingen™ Stain (FBS)، رقم المنتج 554656 أو BD Pharmingen™ Stain (BSA)، رقم المنتج 554657] إلى الأنابيب أو الحجم المطلوب إلى آبار الصفيحة. 5. اغسل الجزيئات عن طريق طرد الأنابيب أو الصفيحة بالطرد المركزي لمدة 5 دقائق عند 500 × g، ثم اسحب السائل الطافي فورًا لتقليل فقدان الجزيئات، مع الحرص على عدم تحريك الراسب. اغسل مرتين بتكرار الخطوتين 4 و5، مع ترك حوالي 50 ميكرولتر من السائل الطافي في الأنبوب بعد كل عملية شفط. ملاحظة: • للحصول على أفضل نتائج نسبة الإشارة إلى الضوضاء، استخدم جهاز شفط فراغي واسحب السائل الطافي باستخدام طرف ماصة دقيق. 6. أعد تعليق الراسب بالتقليب الدوامي، ثم أضف 0.3-0.5 مل من محلول التلوين. 7. احصل على بيانات BD™ SpectraComp™ Unmixing and Compensation Particles باستخدام نفس إعدادات الجهاز لمعاملات تشتت الضوء الأمامي والجانبي (FSC-A وSSC-A) المستخدمة لتحليل الخلايا. يُوصى بالحصول على البيانات فورًا بعد التلوين. 8. حدد مجموعة الخرزات المفردة بناءً على خصائص FSC (تشتت الضوء الأمامي) وSSC (تشتت الضوء الجانبي). 9. للتعويض أو الفصل الطيفي، استخدم البروتوكول المناسب لنظام قياس التدفق الخلوي الخاص بك. 10. تابع للحصول على عينات الخلايا للتجربة. يوصى باختبار جزيئات BD™ SpectraComp™ Unmixing and Compensation Particles للتأكد من دقة التعويض أو الفصل الطيفي.
إشعارات المنتج: يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تم تطوير هذا المنتج وتصنيعه بواسطة شركة Slingshot Biosciences, Inc.، إيميريفيل، كاليفورنيا.