BD، 571324، BD Phosflow™ RB613 مضاد الفأر البشري NF-κB p65 (pS529)

الاسم البديل: RELA؛ REL-A؛ NFKBp65؛ NFKB3؛ عامل النسخ p65؛ TF65
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)
النمط المصلي: IgG2b، κ للفأر BALB/c
المستضد: ببتيد NF-κB p65 البشري المفسفر
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
حجم العينة لكل اختبار: 5 ميكرولتر/اختبار
معرف جين Entrez: 5970
RRID: AB_3686368
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الصبغة غير المتفاعلة. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات التحليل الموصى بها: يمكن استخدام خرز BD® CompBeads كبديل لتقييم التداخل الفلوري (التعويض). عند ارتباط الأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم بخرز BD® CompBeads، فإنها تمتلك خصائص طيفية مشابهة جدًا للخلايا. مع ذلك، قد توجد اختلافات طفيفة في الانبعاثات الطيفية لبعض الفلوركرومات مقارنةً بالخلايا، مما يؤدي إلى قيم تداخل تختلف عند مقارنتها بالضوابط البيولوجية. يُنصح بشدة، عند استخدام أي كاشف لأول مرة، بمقارنة التداخل على الخلايا وخرز BD® CompBeads للتأكد من ملاءمة خرز BD® CompBeads لتطبيقك الخلوي المحدد.
إشعارات المنتج: يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. عند استخدام تراكيز عالية من الأجسام المضادة، لوحظ ارتباط غير مباشر لهذا الصبغ بشظايا خلايا الدم الحمراء الناتجة عن التحلل باستخدام كلوريد الأمونيوم، كما هو الحال مع محلول التحلل BD Pharm Lyse™ (رقم المنتج 555899)، وذلك عند وجود مُقترن الأجسام المضادة أثناء عملية التحلل. قد يُسبب هذا تلوينًا غير نوعي للخلايا المستهدفة، مثل خلايا الدم البيضاء، التي ارتبطت بشظايا خلايا الدم الحمراء الناتجة. يُمكن التخفيف من هذا التلوين غير المباشر باتباع أي مما يلي: معايرة مُقترن الأجسام المضادة إلى تركيز أقل، أو تثبيت العينات بالفورمالديهايد، أو إزالة خلايا الدم الحمراء قبل التلوين (مثل الطرد المركزي المتدرج أو التحلل المسبق بالغسل). لم تُلاحظ هذه الخلفية عند تحليل الخلايا باستخدام محلول BD FACS™ Lysing Solution (رقم المنتج 349202) بعد التلوين. تنبيه: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية بحجم 100 ميكرولتر (اختبار). للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى زيارة صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. يجب استخدام عنصر تحكم متماثل النمط بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. يُرجى زيارة http://regdocs.bd.com للاطلاع على صحائف بيانات السلامة (SDS). لوحظت خلفية خاصة بالمتبرعين البشريين فيما يتعلق بوجود أجسام مضادة لبولي إيثيلين جلايكول (PEG)، والتي تتكون نتيجة لبعض اللقاحات التي تحتوي على PEG، بما في ذلك بعض لقاحات كوفيد-19. نوصي باستخدام محلول التلوين BD Horizon Brilliant™ في تجاربكم للمساعدة في تقليل الخلفية المحتملة. لمزيد من المعلومات، تفضلوا بزيارة https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لحماية الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، من التعرض لأي إضاءة في الغرفة. يمكن أن يؤثر امتصاص الضوء المرئي بشكل كبير على أطياف الانبعاث والعائد الكمي لمركبات الفلوركروم المزدوجة. تحتوي الفلوركرومات المزدوجة على كل من مانح ومستقبل للطاقة. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين الدفعات في كفاءة نقل طاقة الفلوركروم، فقد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من المُعطي. إضافةً إلى ذلك، قد تُثير أجهزة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر كلاً من فلوروكروم المُعطي والمُستقبل بشكل مباشر. لذا، نوصي لكل مُقترن ترادفي، بالحصول على عينة تحكم فردية مُطابقة أحادية التلوين لإنشاء مصفوفة تعويض أو فصل طيفي. CF™ علامة تجارية مسجلة لشركة Biotium, Inc. للاطلاع على براءات الاختراع الأمريكية التي قد تنطبق، يُرجى زيارة bd.com/patents.