BD، 572353، BD Horizon™ RY655 مضاد غرانزيم ب البشري للفئران

الاسم البديل: GZMB؛ غرانزيم-2؛ CCPI؛ CGL1؛ CSPB؛ CTLA1؛ CTSGL1؛ GRB؛ HLP؛ SECT
التفاعل: بشري (اختبار مراقبة الجودة)، فأر (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1، κ للفأر BALB/c
المستضد: غرانزيم ب البشري
التطبيق: التلوين داخل الخلايا (قياس التدفق الخلوي) (يتم اختباره بشكل روتيني)
معرف جين Entrez: 3002، 14939
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على ≤0.09% من أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. تم ربط الجسم المضاد بالصبغة في ظل الظروف المثلى، وتمت إزالة الصبغة غير المتفاعلة. يُحفظ غير مخفف في درجة حرارة 4 درجات مئوية، ويُحفظ بعيدًا عن الضوء لفترات طويلة. لا يُجمد.
إجراءات التحليل الموصى بها: يمكن استخدام ضوابط التعويض أو الفصل القائمة على الخرز، مثل BD® CompBeads أو BD™ SpectraComp™، كبدائل لتقييم تداخل الفلورة عند ارتباطها بالأجسام المضادة المقترنة بالفلوركروم. على الرغم من أن هذه الخرزات لها خصائص طيفية مشابهة للخلايا، إلا أنه قد تحدث اختلافات في الانبعاث الطيفي، مما يؤدي إلى قيم تداخل مختلفة مقارنةً بالضوابط البيولوجية. لذلك، يُعتبر من أفضل الممارسات مقارنة التداخل الناتج عن الخلايا وضوابط الخرز عند استخدام BD® CompBeads أو BD™ SpectraComp™ لأول مرة، لضمان ملاءمتها للتطبيق المقصود.
إشعارات المنتج: يُرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية. يجب استخدام عنصر تحكم من نفس النوع بنفس تركيز الجسم المضاد المطلوب. يُرجى مراجعة http://regdocs.bd.com للوصول إلى صحائف بيانات السلامة (SDS). عند استخدام تراكيز عالية من الجسم المضاد، لوحظ ارتباط غير نوعي لهذا الصبغ بشظايا خلايا الدم الحمراء الناتجة عن التحلل باستخدام كلوريد الأمونيوم، كما هو الحال مع محلول التحلل BD Pharm Lyse™ (رقم المنتج 555899)، وذلك عند وجود الجسم المضاد المقترن أثناء عملية التحلل. قد يتسبب هذا في تلوين غير نوعي للخلايا المستهدفة، مثل خلايا الدم البيضاء، التي ارتبطت بشظايا خلايا الدم الحمراء الناتجة. يمكن التخفيف من هذه الخلفية باتباع أي من الطرق التالية: معايرة مُقترن الأجسام المضادة إلى تركيز أقل، أو تثبيت العينات بالفورمالديهايد، أو إزالة كريات الدم الحمراء قبل التلوين (مثل الطرد المركزي المتدرج أو التحلل المسبق بالغسل). لم تُلاحظ هذه الخلفية عند تحلل الخلايا باستخدام محلول BD FACS™ Lysing Solution (رقم المنتج 349202) بعد التلوين. تنبيه: ينتج عن أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. تم تخفيف هذا الكاشف مسبقًا للاستخدام بالحجم الموصى به لكل اختبار. نستخدم عادةً 1 × 10^6 خلية في عينة تجريبية حجمها 100 ميكرولتر (اختبار). للاطلاع على أطياف الفلوركروم وإعدادات الجهاز المناسبة، يُرجى الرجوع إلى صفحة قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان على موقعنا الإلكتروني www.bdbiosciences.com/colors. لوحظت خلفية خاصة بالمتبرعين البشريين فيما يتعلق بوجود أجسام مضادة لبولي إيثيلين جلايكول (PEG)، والتي تتكون نتيجة لبعض اللقاحات التي تحتوي على PEG، بما في ذلك بعض لقاحات كوفيد-19. نوصي باستخدام محلول التلوين BD Horizon Brilliant™ في تجاربكم للمساعدة في تقليل الخلفية المحتملة. لمزيد من المعلومات، تفضلوا بزيارة https://www.bdbiosciences.com/en-us/support/product-notices. يرجى مراعاة الاحتياطات التالية: نوصي باتخاذ احتياطات خاصة (مثل تغليف القوارير أو الأنابيب أو الحوامل بورق الألومنيوم) لحماية الكواشف المقترنة، بما في ذلك الخلايا المصبوغة بهذه الكواشف، من التعرض لأي إضاءة في الغرفة. يمكن أن يؤثر امتصاص الضوء المرئي بشكل كبير على أطياف الانبعاث والعائد الكمي لمركبات الفلوركروم المزدوجة. تحتوي الفلوركرومات المزدوجة على كل من مانح ومستقبل للطاقة. على الرغم من بذل قصارى الجهد لتقليل التباين بين دفعات إنتاج الفلوركروم في كفاءة نقل الطاقة، قد تُلاحظ اختلافات في الانبعاث المتبقي من المادة المانحة. إضافةً إلى ذلك، قد تُثير أجهزة قياس التدفق الخلوي متعددة الليزر كلاً من الفلوركروم المانح والمستقبل بشكل مباشر. لذا، نوصي لكل مُقترن ترادفي، بالحصول على عينة تحكم فردية مُطابقة أحادية التلوين لإنشاء مصفوفة تعويض أو فصل طيفي. Cy هي علامة تجارية لشركة Global Life Sciences Solutions Germany GmbH أو إحدى الشركات التابعة لها التي تُمارس أعمالها تحت اسم Cytiva. للاطلاع على براءات الاختراع الأمريكية التي قد تنطبق، يُرجى زيارة bd.com/patents.