Product Description
الاسم البديل: Oct3، OTF3، Oct4، OTF4، POU5F1
التفاعل: الفأر (اختبار مراقبة الجودة)، الإنسان (تم اختباره أثناء التطوير)
النمط المصلي: IgG1 الفأري، κ
المستضد: بروتين Oct3 الفأري المؤتلف، الأحماض الأمينية 252-372
التطبيقات: التصوير الحيوي، لطخة ويسترن (يتم اختبارها بشكل روتيني)، التألق المناعي (يتم اختبارها أثناء التطوير)
الوزن الجزيئي المستهدف: 46 كيلو دالتون
التركيز: 250 ميكروغرام/مل
RRID: AB_398736
محلول التخزين: محلول مائي منظم يحتوي على BSA والجلسرين و ≤0.09٪ أزيد الصوديوم.
الوضع التنظيمي: للاستخدام البحثي فقط
التحضير والتخزين: يُحفظ غير مخفف عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. تم تنقية الجسم المضاد أحادي النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة أو السائل الاستسقائي بواسطة كروماتوغرافيا التقارب.
إجراءات الفحص الموصى بها: التصوير الحيوي 1. ازرع الخلايا في وسط زراعة مناسب بكثافة خلوية مناسبة في صفيحة تصوير BD Falcon™ ذات 96 بئرًا (رقم المنتج 353219)، واتركها في الحضانة من ليلة إلى 48 ساعة. 2. أزل وسط الزراعة من الآبار، واغسلها مرتين بـ 100 ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز 1x، ثم ثبّت الخلايا بإضافة 100 ميكرولتر من الفورمالديهايد الطازج بتركيز 3.7% في محلول الفوسفات الملحي (PBS) أو محلول التثبيت BD Cytofix™ (رقم المنتج 554655) إلى كل بئر، واحضنها لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة. 3. أزل المُثبِّت من الآبار، واغسلها مرتين بـ 100 ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز 1x. ٤. قم بزيادة نفاذية الخلايا بإضافة ١٠٠ ميكرولتر من محلول BD Perm/Wash™ المخفف (رقم المنتج ٥٥٤٧٢٣) إلى كل بئر، ثم حضّنها لمدة ٣٠ دقيقة في درجة حرارة الغرفة. ٥. أزل عامل زيادة النفاذية، واغسل الآبار مرتين باستخدام ١٠٠ ميكرولتر من محلول PBS المخفف. ٦. خفف الجسم المضاد في محلول BD Perm/Wash™، ثم صبغ الخلايا بإضافة ٥٠ ميكرولتر من الجسم المضاد المخفف إلى كل بئر، ثم حضّنها لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. ٧. أزل الجسم المضاد المخفف، واغسل الآبار ثلاث مرات باستخدام ١٠٠ ميكرولتر من محلول PBS المخفف. ٨. أزل محلول الفوسفات الملحي (PBS)، وخفف كاشف الخطوة الثانية في محلول BD Perm/Wash™، ثم صبغ الخلايا بإضافة ٥٠ ميكرولتر من كاشف الخطوة الثانية المخفف إلى كل بئر، وحضّنها لمدة ساعة واحدة في درجة حرارة الغرفة. ٩. أزل كاشف الخطوة الثانية المخفف، واغسل الآبار مرتين بـ ١٠٠ ميكرولتر من محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز ١x. ١٠. أزل محلول الفوسفات الملحي (PBS)، وصبغ النوى بشكل معاكس بإضافة ١٠٠ ميكرولتر من محلول هوكست ٣٣٣٤٢ بتركيز ٢ ميكروغرام/مل (مثلًا، سيغما-ألدريتش، رقم المنتج B2261) في محلول الفوسفات الملحي (PBS) بتركيز ١x إلى كل بئر قبل ١٥ دقيقة على الأقل من التصوير. ١١. اعرض الخلايا وحللها باستخدام جهاز تصوير مناسب.
ملاحظات المنتج: نظرًا لاختلاف التطبيقات، ينبغي على كل باحث معايرة الكاشف للحصول على أفضل النتائج. مصدر جميع بروتينات المصل هو مسالخ معتمدة من وزارة الزراعة الأمريكية، وتقع في الولايات المتحدة. تحذير: ينتج أزيد الصوديوم حمض الهيدرازويك شديد السمية في الظروف الحمضية. خفف مركبات الأزيد بالماء الجاري قبل التخلص منها لتجنب تراكم رواسب قابلة للانفجار في أنابيب الصرف الصحي. يرجى مراجعة www.bdbiosciences.com/us/s/resources للاطلاع على البروتوكولات الفنية.
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924