Bio-Rad، 17002826، مجموعة iScript™ Explore One-Step RT and PreAmp، 250 × 50 ميكرولتر من التفاعلات

250 تفاعلًا بحجم 50 ميكرولتر، تحتوي على إنزيم النسخ العكسي المتقدم iScript، ومزيج PreAmp 2x (نيوكليوتيدات ثلاثية الفوسفات، وبوليميراز الاندماج Sso7d، وأملاح، ومُحسِّنات، ومُثبِّتات، ومكونات أخرى خاصة)، ومُعزِّز للتفاعل، وإنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز، ومحلول منظم لإنزيم ديوكسي ريبونيوكلياز، وماء خالٍ من النيوكلياز.
ملخص
استخدم مجموعة iScript Explore One-Step RT and PreAmp Kit لإنتاج cDNA مُضخّم مسبقًا مباشرةً من RNA في خطوة واحدة. تُعدّ هذه المجموعة مثاليةً للكشف عن العديد من الأهداف من عينة محدودة، أو للكشف الموثوق عن الأهداف المُعبَّر عنها بمستويات منخفضة. يوفر بروتين Sso7d المدمج الحاصل على براءة اختراع تضخيمًا مسبقًا غير متحيز ومحددًا للأهداف لما يصل إلى 100 هدف. كما تتضمن المجموعة خطوة هضم فعالة لإزالة الحمض النووي الجينومي، مما يضمن الكشف عن النسخ المطلوبة فقط بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR).
الميزات والفوائد
• النسخ العكسي والتضخيم المسبق بخطوة واحدة - المجموعة الأولى والوحيدة التي تلغي خطوات البروتوكول عن طريق توليد الحمض النووي التكميلي المضخم مسبقًا من الحمض النووي الريبي في خطوة واحدة
• التضخيم المسبق غير المتحيز — يمكنه تحديد خصائص مجموعات الأهداف بشكل موثوق
• حساسية عالية — تُمكّن من الكشف الموثوق عن الجينات التي يتم التعبير عنها بمستويات منخفضة
• التحكم في التضخيم المسبق — يمكن تقييم فعالية التضخيم المسبق بسهولة عند استخدامه مع مصفوفات PrimePCR™ للحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر (lncRNA) أو لوحات PrimePCR المخصصة
• إزالة فعالة للحمض النووي الجينومي (gDNA) - مما يضمن أن النتائج تخص فقط النسخة الجينية المطلوبة
سير عمل بسيط
ببساطة، يمكنك تحضير الحمض النووي التكميلي (cDNA) المُضخّم مسبقًا والخالي من الحمض النووي الجينومي (gDNA) عن طريق دمج الكواشف الموجودة في هذه المجموعة مع عينة الحمض النووي الريبوزي (RNA) واختبارات التضخيم المسبق (PreAmp Assays). تحتوي هذه المجموعة على جميع الكواشف اللازمة لتضخيم الحمض النووي التكميلي (cDNA) بسهولة وبشكل غير متحيز بمقدار 1000 ضعف.
تضخيم الأهداف مسبقًا بدون تحيز
تُعدّ تقنية التضخيم المسبق أداةً فعّالةً تُمكّن من الكشف عالي الحساسية عن عدد كبير من الأهداف من عينة محدودة. وبفضل الجمع بين المحاليل المنظمة الخاصة وتقنية دمج Sso7d، يُتيح طقم iScript Explore One-Step RT and PreAmp Kit إمكانية توليد تفاعلات تضخيم مسبق غير متحيزة بغض النظر عن كمية الهدف الموجودة.
أهمية معالجة تلوث الحمض النووي الجينومي في التعبير الجيني بتقنية RT-qPCR
يمكن أن يؤدي تلوث عينات الحمض النووي الريبوزي (RNA) بالحمض النووي الجينومي (gDNA) إلى تضخيمها في تجارب تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي العكسي (RT-qPCR) التي تستخدم بادئات إكسونية، مما يؤثر على نتائج النسخة المستهدفة. وتبرز هذه المشكلة بشكل خاص في الجينات منخفضة التعبير، مثل الحمض النووي الريبوزي غير المشفر الطويل (lncRNAs)، حيث يمكن حتى لعدد قليل من نسخ الحمض النووي الجينومي الملوث أن يُغير قيم العتبة (Cq) بشكل كبير. تعالج مجموعة iScript Explore One-Step RT and PreAmp Kit هذه المشكلة باستخدام إنزيم ديوكسي ريبونوكلياز (DNase) مُصمم خصيصًا لإزالة الحمض النووي الجينومي من الحمض النووي الريبوزي النقي بكفاءة عالية.
التطبيقات والاستخدامات
• للكشف الموثوق عن الأهداف التي يتم التعبير عنها بمستويات منخفضة، بما في ذلك الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر (lncRNAs)
• يسهل فحص عدد كبير من الجينات من عينات محدودة، وهو فعال بشكل خاص عند استخدام مصفوفات PrimePCR
• مثالي لسير عمل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي للخلايا المفردة
• للكشف عالي الحساسية عند العمل مع عينات محدودة، بما في ذلك عمليات التشريح المجهري بالليزر، والخزعات بالإبرة، والأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة في البارافين (FFPE).
خيارات التغليف
مقارنة منتجات التضخيم المسبق
اختر منتج التضخيم المسبق الذي يناسب احتياجاتك على أفضل وجه.
• يُستخدم الحمض النووي الريبي (RNA) كمدخل للعينة
• تم إجراء النسخ العكسي باستخدام التمهيد الخاص بالجين
• تضخيم مسبق غير متحيز
• يقلل البروتوكول من وقت العمل اليدوي
• متوافق مع برنامج PrimePCR PreAmp Control (PAQ)
• تتضمن المجموعة خطوة فعالة لهضم الحمض النووي الجينومي
• قم بإجراء عملية تخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA) باستخدام أي من كواشف النسخ العكسي من iScript
• يُستخدم الحمض النووي التكميلي (cDNA) كمدخل للعينة في تفاعل التضخيم المسبق
• تضخيم مسبق غير متحيز
• المرونة في اختيار طريقة تخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA)
• حفظ الحمض النووي التكميلي (cDNA) لإجراء دراسات مستقبلية على جينات مختلفة
الفئات ذات الصلة
• سير عمل تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي العكسي للرنا غير المشفر الطويل
• مزيج تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي
• أنظمة الكشف بتقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي
• بادئات واختبارات تفاعل البوليميراز المتسلسل PrimePCR
• المواد الاستهلاكية البلاستيكية المعاد تدويرها
المستندات الداعمة
• كتيب كواشف التضخيم والبلاستيك
• كتيب مبسط لاكتشاف الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر
• دليل تعليمات مجموعة iScript Explore One-Step RT and PreAmp
الموارد الإلكترونية
• ما هو تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي في الوقت الحقيقي (qPCR)؟
المنتجات الأكثر مبيعاً
#1610747 4x محلول لايملي لتحضير العينات
#1610732 10x Tris/Glycine/SDS
#1610374 معايير بروتين بريسيجن بلس ثنائية اللون، 500 ميكرولتر
#HSP9601 صفائح تفاعل البوليميراز المتسلسل ذات الغلاف الصلب 96 بئراً، منخفضة الارتفاع، ذات جدار رقيق، مزودة بحافة، بيضاء/شفافة
عبوة من 50 صفيحة تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ذات غلاف أبيض/بئر شفاف، بتصميم صلب ثنائي المكونات
#12010020 محلول حجب EveryBlot، 500 مل
زجاجة من محلول الحجب، 500 مل. يتطلب 5 دقائق فقط من الحجب لجميع لطخات ويسترن، ويلغي وقت الحضانة في فحوصات ELISA.
#4561096 جل بروتين جاهز للصب Mini-PROTEAN® TGX™ بتركيز 4-20%، 15 بئراً، 15 ميكرولتر
عبوة من 10 قطع، جل بولي أكريلاميد مُسبق الصب بنسبة 4-20%، 8.6 × 6.7 سم (عرض × طول)، للاستخدام مع خلايا الرحلان الكهربائي Mini-PROTEAN
#12001925 لوحات ddPCR™ ذات 96 بئراً
عبوة من 25 لوحة شفافة ذات حواف نصفية، للاستخدام مع أنظمة QX600/QX200 Droplet Digital™ PCR
#4561094 جل بروتين جاهز للصب Mini-PROTEAN® TGX™ بتركيز 4-20%، 10 آبار، 50 ميكرولتر
عبوة من 10 قطع، جل بولي أكريلاميد مُسبق الصب بنسبة 4-20%، 8.6 × 6.7 سم (عرض × طول)، للاستخدام مع خلايا الرحلان الكهربائي Mini-PROTEAN
#1863024 مزيج ddPCR الفائق للمجسات (بدون dUTP)
5 مل (5 × 1 مل)، مزيج فائق 2x، للاستخدام في تحضير العينات لتوليد القطرات في أنظمة QX600/QX200 الرقمية لتفاعل البوليميراز المتسلسل بالقطرات
#1704156 عبوات نقل PVDF صغيرة الحجم بتقنية Trans-Blot Turbo 0.2 ميكرومتر
عبوة من 10 قطع، 7 × 8.5 سم، عبوة نقل ورق الترشيح المقطوعة مسبقًا، تتضمن ورق ترشيح، ومحلول منظم، وغشاء PVDF بمسام 0.2 ميكرومتر، للاستخدام مع نظام النقل Trans-Blot Turbo
مجموعة iScript™ لتخليق الحمض النووي التكميلي (cDNA) رقم 1708891، 100 تفاعل × 20 ميكرولتر
#1610373 معايير بروتين Precision Plus™ الملونة مسبقًا باللون الأزرق
#1863004 زيت قارئ قطرات ddPCR™
2 لتر (2 × 1 لتر)، زيت للاستخدام مع قارئ القطرات في أنظمة QX600/QX200 Droplet Digital™ PCR
#1725271 SsoAdvanced™ Universal SYBR ® Green Supermix، 500 × 20 ميكرولتر تفاعل، 5 مل (5 × 1 مل)
#1610772 10x Tris/Glycine/SDS
#1705061 ركيزة كلاريتي ويسترن إي سي إل، 500 مل
#1610737 2x محلول لايملي لعينات
#1705060 ركيزة Clarity™ Western ECL، 200 مل
عبوة واحدة تحتوي على 100 مل من كاشف بيروكسيد كلاريتي ويسترن و100 مل من كاشف لومينول/معزز كلاريتي ويسترن
#1704158 عبوات نقل نيتروسليلوز Trans-Blot Turbo Mini 0.2 ميكرومتر
#1620177 غشاء مناعي من البولي فينيليدين فلورايد، لفة، 26 سم × 3.3 م