أغشية نقل PVDF من Cobetter، 2770H-R2703، بمسام 0.45 ميكرومتر، لتحليل البروتينات بتقنية Western Blot

تحقق من هذا المنتج بحجم عبوة 0.45 ميكرومتر / 275 × 3750 مم / لفة واحدة/عبوة على موقع Iright. تتميز أغشية نقل PVDF من Cobetter بحساسية عالية وخلفية منخفضة في تقنية Western blotting. يُعدّ حجم 0.45 ميكرومتر مناسبًا لمعظم تطبيقات Western blotting، بينما يُعدّ حجم 0.2 ميكرومتر مناسبًا لتقنية Western blotting للبروتينات ذات الوزن الجزيئي المنخفض (<20 كيلو دالتون).
تحديد

غشاء
مادة PVDF الكارهة للماء
حجم المسام

0.2 ميكرومتر
0.45 ميكرومتر

سماكة

130 ميكرومتر
125 ميكرومتر

قدرة ربط البروتين (BSA)

300 ميكروغرام/سم²
135 ميكروغرام/سم²

الأبعاد
275 مم × 3.75 م
84 مم × 70 مم
150 مم × 150 مم
200 مم × 200 مم
آليات الربط الرئيسية
كهرساكن، كاره للماء
التفعيل المسبق
يتطلب الإيثانول (الميثانول)
تسامح
مقاوم لمعظم المذيبات العضوية والأحماض والقواعد الضعيفة
التوافق
متوافق مع ظروف النقل وطرق الكشف الشائعة الاستخدام (مثل التلوين، والتألق الكيميائي، والوسم الإشعاعي، وما إلى ذلك).
تخزين
يُحفظ الغشاء بشكل مسطح في درجة حرارة الغرفة بعيدًا عن الأبخرة الكيميائية. قد تُذيب بعض أبخرة المذيبات أجزاءً من الغشاء، مما يُؤدي إلى تعطيل بنية المسام.
طَرد
لفة واحدة/عبوة أو 50 قطعة/عبوة
سمات
سطح أملس ومستوٍ، لن يلتف أو ينكسر عند القطع
قوة ميكانيكية عالية، سهولة الفك وإعادة الفحص عدة مرات
حجم مسام موحد، حركة بروتينية عالية، نطاقات واضحة ومنظمة
تضمن الحساسية العالية والخلفية المنخفضة معدل نجاح الكشف عن البروتينات منخفضة الوفرة
التطبيقات
نقل البروتين
الكشف عن البقع
تحليل الامتزاز
أداء غشاء نقل PVDF
احتياطات
منع دخول الفقاعات إلى ورق الترشيح أو الجل أو الغشاء
بالنسبة للعينات التي تحتوي على ببتيدات صغيرة، يجب ألا يتجاوز وقت توازن الجل في محلول النقل 10 دقائق.
عندما يكون البروتين المستهدف أقل من أو يساوي 15 كيلو دالتون، يمكن استخدام غشاء نقل PVDF بمسام 0.2 ميكرومتر للحصول على أقصى قدر من الاحتفاظ.
لا يُستخدم غشاء نقل PVDF إلا في البحث العلمي من قبل المتخصصين، ولا ينبغي استخدامه في التشخيص أو العلاج السريري أو في الأغذية أو الأدوية.
من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء ملابس المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة.
مقالات ذات صلة
أغشية نقل PVDF في تقنية ويسترن بلوت: دراسات حالة في مجلات SCI
مقارنة بين غشاء PVDF وغشاء النيتروسليلوز في تقنية ويسترن بلوت - أيهما نختار؟
لماذا تُعد أغشية نقل PVDF مثالية لتطبيقات التلطيخ الغربي؟ س: هل يحتوي غشاء نقل PVDF من Cobetter على وجه أمامي وخلفي؟ هل يتطلب تنشيطًا قبل الاستخدام؟
تتميز أغشية نقل PVDF من Cobetter بسطح أملس وموحد ولا تتطلب التمييز بين الجانبين الأمامي والخلفي أثناء الاستخدام.
قبل الاستخدام، قم بترطيب الغشاء مسبقًا بالإيثانول المطلق أو الميثانول المطلق. بعد التنشيط، يتغير لون الغشاء من الأبيض المعتم إلى شبه الشفاف. يُنصح بنقعه لمدة تتراوح بين 30 و60 ثانية.
س: هل أغشية نقل PVDF من Cobetter متوفرة بأحجام مقطوعة مسبقًا؟
تتوفر أغشية نقل Cobetter على شكل لفائف وألواح مقطعة مسبقًا ومعبأة في صناديق، لتلبية الاحتياجات التجريبية المختلفة.
مقاس اللفة: 26.5 سم × 3.75 م
ألواح مقطوعة مسبقًا: 200 مم × 200 مم؛ 84 مم × 70 مم
س: كيف يتم اختيار حجم المسام المناسب لأغشية نقل PVDF؟
اختر غشاء النقل المناسب بناءً على الوزن الجزيئي للبروتين:
البروتينات الصغيرة (<20 كيلو دالتون): استخدم غشاء نقل PVDF بمسام 0.2 ميكرومتر
البروتينات الكبيرة (>20 كيلو دالتون): استخدم غشاء نقل PVDF بمسام 0.45 ميكرومتر
س: ما الذي يجب مراعاته عند إجراء عملية التلطيخ الغربي لبروتين ذي وزن جزيئي عالٍ (~200 كيلو دالتون)؟
استخدم جلًا فاصلًا بنسبة تركيز منخفضة، ويفضل أن تكون حوالي 7%.
تعامل مع الجل بحرص أثناء عملية التقشير/الإزالة لتجنب التلف.
قم بتمديد وقت النقل لضمان نقل البروتين بكفاءة.
قم بتضمين علامة الوزن الجزيئي، وإلا فقد يصعب تفسير الحزم غير المحددة.
س: كيف ينبغي ضبط شروط النقل في عملية التلطيخ الغربي؟
بالنسبة للبروتينات التي يتراوح وزنها بين 15 و100 كيلو دالتون، فإن الحالة النموذجية هي تيار ثابت قدره 300 مللي أمبير لمدة 45 دقيقة.
بالنسبة للبروتينات التي يزيد وزنها عن 100 كيلو دالتون، يوصى عمومًا باستخدام تيار أقل (حوالي 220 مللي أمبير) مع وقت نقل أطول.
بناءً على التجربة: يمكن نقل بروتين ZO-1 (بوزن 250 كيلو دالتون) بنجاح خلال ساعتين ونصف. أما البروتينات التي يبلغ وزنها 150 كيلو دالتون فيمكن نقلها خلال ساعة ونصف.
على سبيل المثال: إذا كان أكبر بروتين مستهدف هو 200 كيلو دالتون، فيمكن تقدير حالة النقل على النحو التالي: 220 مللي أمبير × (200 / 150) ≈ 134 دقيقة، بالإضافة إلى حوالي 15-20 دقيقة إضافية، مما ينتج عنه وقت نقل إجمالي يبلغ حوالي 150 دقيقة.
س: كيف يمكن تقليل الخلفية على غشاء PVDF الخاص بتحليل ويسترن بلوت؟
١. ضمان عملية الحجب المناسبة. تتطلب أغشية PVDF خطوات حجب أكثر دقة. يمكن تحقيق ذلك عن طريق زيادة تركيز عامل الحجب من ٢ إلى ٥ أضعاف، وزيادة مدة الحجب، وإجراء العملية عند درجة حرارة ٣٧ درجة مئوية.
2. يمكن أن يؤدي تحسين نسب تخفيف الأجسام المضادة الأولية والثانوية إلى تقليل الخلفية غير المحددة.
3. قم بإجراء غسل شامل، وحافظ على الغشاء رطباً باستمرار وخالياً من التلوث خلال جميع الخطوات.
س: ما هي مزايا أغشية نقل PVDF من Cobetter؟
1. سطح أملس ومستوٍ، مقاوم للتجعد.
2. قوة ميكانيكية عالية، مما يسمح بسهولة الفك والاستخدام المتكرر.
3. حجم مسام موحد ومتسق، مما يتيح كفاءة عالية في نقل البروتين ونطاقات حادة ومحددة جيدًا.
4. حساسية أعلى، مما يحسن معدل نجاح الكشف عن البروتينات منخفضة الوفرة
س: كيف ينبغي اختيار ورق الترشيح السليلوزي لتقنية ويسترن بلوت؟
ينبغي أن يكون حجم ورق الترشيح أكبر قليلاً من حجم الجل وغشاء نقل PVDF.
صُممت أوراق الترشيح السليلوزية المقطوعة مسبقًا من Cobetter لتتناسب مع أغشية نقل PVDF، مما يوفر سهولة في التعامل وملاءمة مثالية.