CST، 12130S، SignalSilence® Cbl-b siRNA I

siRNA لدراسة Cbl-b في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® Cbl-b siRNA I قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية بروتينات سرطان الغدد الليمفاوية من سلالة كاسيتاس ب (Cbl) (وهي في الثدييات c-Cbl وCbl-b وCbl-c) هي عائلة من إنزيمات ربط اليوبيكويتين E3 أحادية الوحدة ذات حلقة إصبعية، وتحتوي على العديد من أنماط تفاعل البروتينات (1). تمتلك جميع بروتينات Cbl نطاقًا محفوظًا للغاية في الطرف الأميني (N-terminal) لربط التيروزين كيناز (TKB)، والذي يتوسط التفاعلات بين بروتينات Cbl وبقايا التيروزين المفسفرة على ركائز Cbl. في الطرف الكربوكسيلي (C-terminal) لحلقة الإصبعية، تحتوي بروتينات Cbl على نطاقات غنية بالبرولين تتوسط التفاعلات مع البروتينات الحاوية على نطاق SH3. تتوسط بقايا التيروزين المفسفرة التفاعلات مع البروتينات الحاوية على نطاق SH2، مثل الوحدة الفرعية p85 من PI3K. تسمح أنماط تفاعل البروتين-بروتين هذه لبروتينات عائلة Cbl بالعمل كبروتينات محولة (2). تساهم وظيفة هذا البروتين المُحَوِّل في أنشطة بروتينات Cbl المعتمدة على إنزيم E3 من خلال استهداف ركائز مُحددة لعملية اليوبيكويتين والتحلل. كما تُسهم هذه الوظيفة في أنشطة أخرى غير معتمدة على إنزيم E3، مثل استقطاب البروتينات المُشاركة في استدخال مستقبلات التيروزين كيناز، وتحديد موقع بروتينات Cbl في حجيرات خلوية فرعية مُحددة، وتفعيل مسارات إشارات مُنفصلة (1). يُعد Cbl-b إنزيم E3 ليغاز اليوبيكويتين، ويتميز بتنظيم نطاقي مُطابق تقريبًا لتنظيم نطاق c-Cbl. دور Cbl-b في فسيولوجيا خلايا الدم موثق جيدًا. يُعد التعبير عن Cbl-b مهمًا لتثبيط التعبير عن مستقبلات الخلايا التائية (TCR) أثناء التعرف على المُستضد (2). يعمل Cbl-b أيضًا كمُنظم سلبي قوي لسلسلة إشارات CD28 إلى Vav وRac1 من خلال قدرته على إضافة اليوبيكويتين إلى الوحدة التنظيمية p85 من PI3K (3، 4). يُعدّ Cbl-b مُنظِّمًا أساسيًا لفقدان الاستجابة المناعية في الخلايا التائية، حيث يرتفع مستوى mRNA والبروتين الخاص به في الخلايا التائية بعد تحفيز الكالسيوم وتنشيط الكالسينيورين (5). وتُظهر الخلايا التائية التي تفتقر إلى Cbl-b مقاومةً لتحفيز فقدان الاستجابة المناعية (5). يُعتقد أن الأحداث الجزيئية التي تُحكم هذه الظاهرة مرتبطة بعيوب في إضافة اليوبيكويتين إلى PLCγ1 وPKCθ، إذ أن تحلل جزيئات الإشارة هذه، الذي يحدث بعد إعادة تحفيز الخلايا التائية الطبيعية التي تعاني من فقدان الاستجابة المناعية، لا يحدث في الخلايا التائية التي تفتقر إلى Cbl-b (5). مواصفة التفاعل: H