مجموعة CST، 12235S، PTMScan® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG]

برنامج PTMScan للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج تُحلل الخلايا في محلول منظم يحتوي على اليوريا، وتُهضم البروتينات الخلوية بواسطة إنزيمات البروتياز، ثم تُنقى الببتيدات الناتجة باستخدام استخلاص الطور الصلب ذي الطور المعكوس. بعد ذلك، تُخضع الببتيدات لتنقية المناعة باستخدام جسم مضاد PTMScan® Motif مرتبط بخرزات بروتين A أجاروز. تُزال الببتيدات غير المرتبطة بالغسل، وتُستخلص الببتيدات الحاملة لتعديلات ما بعد الترجمة (PTM) باستخدام حمض مخفف. تُجرى عملية تنقية الطور المعكوس على رؤوس دقيقة لإزالة الأملاح وفصل الببتيدات عن الجسم المضاد قبل تركيز الببتيدات المُثرية لتحليلها بتقنية LC-MS/MS. توصي شركة CST باستخدام محلول PTMScan® IAP رقم 9993 المرفق مع المجموعة. يحتوي طقم PTMScan ® Mono-Methyl Arginine Motif [mme-RG] على إصدار خرز مغناطيسي ذي حساسية وخصوصية أعلى: طقم PTMScan ® HS Mono-Methyl Arginine Motif (mme-RG) بتنسيقات 10 فحوصات (#98567) أو 3 فحوصات (#87654). تخزين تُزوَّد حبيبات الأجسام المضادة في محلول منظم IAP يحتوي على 50% جلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: PTMScan خلفية يُعدّ مثيلة الأرجينين تعديلًا شائعًا بعد الترجمة، ويوجد على البروتينات النووية والسيتوبلازمية. وتشارك البروتينات المُثيلة بالأرجينين في العديد من العمليات الخلوية المختلفة، بما في ذلك تنظيم النسخ، ونقل الإشارات، واستقلاب الحمض النووي الريبوزي (RNA)، وإصلاح تلف الحمض النووي (DNA) (1-3). تتم مثيلة الأرجينين بواسطة عائلة إنزيمات ناقلة ميثيل الأرجينين (PRMT) التي تحفز نقل مجموعة ميثيل من S-أدينوسيل ميثيونين (AdoMet) إلى ذرة نيتروجين الغوانيدين في الأرجينين (4). وهناك ثلاثة أنواع مختلفة من مثيلة الأرجينين: ثنائي ميثيل الأرجينين غير المتماثل (aDMA، أوميغا-NG،NG-ثنائي ميثيل الأرجينين)، حيث تُوضع مجموعتا ميثيل على إحدى ذرات النيتروجين الطرفية لمجموعة الغوانيدين في الأرجينين؛ وثنائي ميثيل الأرجينين المتماثل (sDMA، أوميغا-NG،NG-ثنائي ميثيل الأرجينين)، حيث تُوضع مجموعة ميثيل واحدة على كل من ذرتي نيتروجين الغوانيدين الطرفيتين في الأرجينين؛ وميثيل أرجينين أحادي الميثيل (MMA، أوميغا-NG-ميثيل أرجينين)، حيث تُضاف مجموعة ميثيل واحدة إلى إحدى ذرات النيتروجين الطرفية للأرجينين. ولكل من هذه التعديلات عواقب وظيفية مختلفة محتملة. على الرغم من أن جميع بروتينات PRMT تحفز تكوين MMA، فإن بروتينات PRMT من النوع الأول (PRMT1، 3، 4، 6، و8) تضيف مجموعة ميثيل إضافية لإنتاج aDMA، بينما تنتج بروتينات PRMT من النوع الثاني (PRMT5 و7) sDMA. غالبًا ما توجد بقايا الأرجينين الميثيلية في نطاقات بروتينية غنية بالجليسين-أرجينين (GAR)، مثل تكرارات RGG وRG وRXR (5). ومع ذلك، يقوم كل من PRMT4/CARM1 وPRMT5 بميثلة بقايا الأرجينين داخل وحدات غنية بالبرولين-جليسين-ميثيونين (PGM) (6).