CST، 12364S، جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب للهيستون H2B (D2H6)

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة الهيستون H2B. مُعتمد للاستخدام في تقنيات التلطيخ الغربي، والكيمياء النسيجية المناعية (البارافين)، وترسيب الكروماتين المناعي. متوفر بحجمين. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة المُستخلص من الأرانب، والمُصنّع من الهيستون H2B (D2H6) (رقم CST #12364)، بدقة عالية وتخصص مُعتمد داخليًا، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج للحصول على أفضل نتائج في تقنية ChIP، استخدم 10 ميكرولتر من الجسم المضاد و10 ميكروغرام من الكروماتين (ما يعادل تقريبًا 4 × 10⁶ خلية) لكل عملية ترسيب مناعي. وقد تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد باستخدام مجموعات SimpleChIP® لترسيب الكروماتين المناعي الإنزيمي. اللطخة الغربية: 1:1000 الكيمياء المناعية النسيجية (البارافين): 1:800 - 1:3200 كروماتين IP: 1:50 تخزين يُزوَّد في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، الكيمياء المناعية النسيجية (البارافين)، ترسيب الكروماتين المناعي النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب والمخصص للهيستون H2B (D2H6) على المستويات الداخلية لبروتين H2B الكلي. ولا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع بروتينات الهيستون الأخرى. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع البقايا المحيطة بـ Val118 من بروتين الهيستون H2B البشري. خلفية يُعدّ النيوكليوسوم، المُكوّن من أربعة بروتينات هيستون أساسية (H2A، H2B، H3، وH4)، الوحدة البنائية الرئيسية للكروماتين. كان يُعتقد سابقًا أن الهيستونات تعمل كدعامة ثابتة لتعبئة الحمض النووي، ولكن تبيّن الآن أنها بروتينات ديناميكية تخضع لأنواع متعددة من التعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الأسيتلة، والفسفرة، والمثيلة، واليوبيكويتين (1، 2). تقوم إنزيمات أسيتيل ترانسفيراز الهيستون p300/CBP بأسيتلة العديد من بقايا الليسين في الطرف الأميني للهيستون H2B (Lys5، 12، 15، و20) عند محفزات الجينات أثناء تنشيط النسخ (1-3). يؤدي فرط أستلة ذيول الهيستون إلى معادلة الشحنة الموجبة لهذه النطاقات، ويُعتقد أنه يُضعف التفاعلات بين الهيستون والحمض النووي وبين النيوكليوسومات، مما يُزعزع استقرار بنية الكروماتين ويزيد من وصول الحمض النووي إلى مختلف البروتينات الرابطة للحمض النووي (4، 5). إضافةً إلى ذلك، تُنشئ أستلة بقايا الليسين المحددة مواقع ارتباط تُسهّل استقطاب العديد من بروتينات تنظيم النسخ والكروماتين التي تحتوي على نطاق برومودومين، والذي يرتبط ببقايا الليسين المؤستلة (6). يخضع الهيستون H2B لعملية إضافة جزيء يوبيكويتين واحد عند الليسين 120 أثناء تنشيط النسخ بواسطة بروتين RAD6 E2 بالاشتراك مع إنزيم BRE1A/BRE1B E3 ليغاز (المعروف أيضًا باسم RNF20/RNF40) (7). يرتبط الهيستون H2B أحادي اليوبيكويتين عند الليسين 120 بالمنطقة المنسوخة من الجينات النشطة، ويُحفز استطالة النسخ عن طريق تسهيل إعادة تشكيل الكروماتين المعتمدة على FACT (7-9). بالإضافة إلى ذلك، يُعدّ هذا ضروريًا لعملية مثيلة الهيستون H3 عند الليسين 4 والليسين 79، وهما تعديلان إضافيان للهيستون ينظمان بدء عملية النسخ واستطالتها (10). استجابةً للإجهاد الأيضي، يتم استقطاب AMPK إلى الجينات المستجيبة، حيث يقوم بفسفرة الهيستون H2B عند الليسين 36، سواءً في المحفزات أو في المناطق المنسوخة من الجينات، وقد ينظم استطالة عملية النسخ (11). استجابةً لمحفزات موت الخلايا المبرمج المتعددة، يتم فسفرة الهيستون H2B عند السيرين 14 بواسطة كيناز Mst1 (12). عند تحفيز موت الخلايا المبرمج، يتم شطر Mst1 وتنشيطه بواسطة كاسبيز-3، مما يؤدي إلى فسفرة شاملة للهيستون H2B أثناء تكثيف الكروماتين. ومن المثير للاهتمام، أن الهيستون H2B يُفسفر بسرعة في بؤر تلف الحمض النووي الناجم عن الإشعاع في الخلايا الليفية الجنينية للفئران (13). في هذه الحالة، يكون الفسفرة عند Ser14 سريعًا، ويعتمد على الفسفرة السابقة لـ H2AX Ser139، ويحدث في غياب موت الخلايا المبرمج، مما يشير إلى أن فسفرة Ser14 قد يكون لها أدوار متميزة في إصلاح تلف الحمض النووي وموت الخلايا المبرمج. أسماء بديلة H2B؛ الهيستون 3 المتجمع H2B؛ عائلة الهيستون H2B، العضو F؛ الهيستون 3 المتجمع H2B؛ H2B.1؛ H2B/f؛ H2B1B؛ H2BC3؛ H2BFF؛ HIST1H2BB؛ الهيستون 1، H2bb؛ مجموعة الهيستون 1، العضو b من عائلة H2B؛ مجموعة الهيستون 1، H2bb؛ الهيستون H2B من النوع 1-B؛ الهيستون H2B.1؛ الهيستون H2B.f؛ MGC119804 مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 14 المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب