CST، 2595S، جسم مضاد للهيستون H2A.X

جسم مضاد متعدد النسائل لدراسة H2AX. مُعتمد للاستخدام في تقنية ويسترن بلوت. يتميز هذا الجسم المضاد للهيستون H2A.X (رقم CST #2595) بدرجة عالية من التخصص، وقد خضع لاختبارات داخلية دقيقة، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج اللطخة الغربية: 1:1000 تخزين يُزوَّد المنتج في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن النوعية / الحساسية يكشف الجسم المضاد للهيستون H2A.X عن المستويات الداخلية لبروتين الهيستون H2A.X بشكل مستقل عن الفسفرة واليوبيكويتين. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة متعددة النسائل عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع البقايا القريبة من الطرف الكربوكسيلي للهيستون البشري H2A.X. يتم تنقية الأجسام المضادة بواسطة كروماتوغرافيا تقارب البروتين A والببتيد. خلفية يُعدّ الهيستون H2A.X نوعًا مُتغيرًا من الهيستون، ويُمثّل حوالي 10% من إجمالي بروتينات الهيستون H2A في الخلايا الليفية البشرية الطبيعية (1). يُعدّ H2A.X ضروريًا لتوقف دورة الخلية بوساطة نقاط التفتيش، ولإصلاح الحمض النووي بعد حدوث كسور في سلسلتي الحمض النووي (1). يؤدي تلف الحمض النووي، الناتج عن الإشعاع المؤين أو الأشعة فوق البنفسجية أو العوامل المُحاكية للإشعاع، إلى فسفرة سريعة لـ H2A.X عند Ser139 بواسطة كينازات شبيهة بـ PI3K، بما في ذلك ATM وATR وDNA-PK (2، 3). في غضون دقائق من تلف الحمض النووي، يُفسفر H2A.X عند Ser139 في مواقع التلف لتكوين γ-H2A.X (4). يُعدّ هذا الحدث المُبكر جدًا في استجابة تلف الحمض النووي ضروريًا لاستقطاب العديد من بروتينات استجابة تلف الحمض النووي، بما في ذلك MDC1 وNBS1 وRAD50 وMRE11 و53BP1 وBRCA1 (1). بالإضافة إلى دوره في إصلاح تلف الحمض النووي، يُعدّ H2A.X ضروريًا لتفتيت الحمض النووي أثناء موت الخلايا المبرمج، ويتم فسفرته بواسطة كينازات مختلفة استجابةً لإشارات موت الخلايا المبرمج. يُفسفر H2A.X عند Ser139 بواسطة DNA-PK استجابةً لتنشيط مستقبلات موت الخلايا، وكيناز c-Jun الطرفي N (JNK1) استجابةً للتعرض للأشعة فوق البنفسجية A، وكيناز p38 MAPK استجابةً لنقص المصل (5-8). يُفسفر H2A.X بشكلٍ دائم على Tyr142 في الخلايا غير المتضررة بواسطة WSTF (عامل النسخ لمتلازمة ويليامز-بورين) (9، 10). عند تلف الحمض النووي، وبالتزامن مع فسفرة Ser139، يُزال الفسفرة من Tyr142 في مواقع تلف الحمض النووي بواسطة فوسفاتازات EYA1 وEYA3 المُستقطبة (9). بينما يُسهّل الفسفرة عند Ser139 استقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي وبروتينات الاستماتة إلى مواقع تلف الحمض النووي، يبدو أن الفسفرة عند Tyr142 هي التي تُحدد مجموعة البروتينات التي يتم استقطابها. تُثبّط فسفرة H2A.X عند Tyr142 استقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي، وتُعزز ارتباط عوامل الاستماتة مثل JNK1 (9). تُظهر الخلايا الليفية الجنينية للفئران التي تُعبّر فقط عن H2A.X Y142F الطافر، الذي يُفضّل استقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي على بروتينات الاستماتة، استجابة استماتة مُخفّضة للإشعاع المؤين (9). بالتالي، يبدو أن توازن فسفرة وإزالة فسفرة H2A.X عند Tyr142 يُوفّر آلية تحويل لتحديد مصير الخلية بعد تلف الحمض النووي. أسماء بديلة عضو X من عائلة الهيستون H2A؛ عضو X من عائلة الهيستون H2A؛ H2A.X؛ هيستون متغير H2A.X؛ H2a/x؛ H2AFX؛ H2AX؛ هيستون H2AX؛ هيستون H2A.x؛ هيستون H2AX مواصفة التفاعل: H Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 15 المصدر: أرنب