CST، 2600S، جسم مضاد لـ Phospho-HP1 gamma (Ser83)

جسم مضاد متعدد النسائل لدراسة فوسفات HP1-gamma (Ser93). مُعتمد للاستخدام في تقنيات التلطيخ الغربي، والترسيب المناعي، والتألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية). يتميز هذا الجسم المضاد Phospho-HP1 gamma (Ser83) (CST #2600) بدقة عالية وتخصص مُعتمد داخليًا، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج اللطخة الغربية: 1:1000 الترسيب المناعي: 1:25 التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية): 1:200 تخزين يُزوَّد المنتج في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، الترسيب المناعي، التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية) النوعية / الحساسية يكشف الجسم المضاد لبروتين HP1γ المفسفر (Ser83) عن المستويات الداخلية لبروتين HP1γ فقط عند فسفرته على الموقع Ser83 (المعروف أيضًا باسم Ser93 في الشكل غير المعالج من HP1γ). ولا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع بروتينات HP1α أو HP1β. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية تُنتَج الأجسام المضادة متعددة النسائل عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد فسفوري اصطناعي يُطابق الأحماض الأمينية المحيطة بـ Ser83 من بروتين HP1γ البشري. وتُنقّى الأجسام المضادة بواسطة كروماتوغرافيا التقارب. خلفية بروتين الهيتروكروماتين 1 (HP1) هو عائلة من جزيئات التكيف الهيتروكروماتينية التي تشارك في كل من إسكات الجينات وبنية الكروماتين عالية الرتبة (1). ترتبط جميع أفراد عائلة HP1 الثلاثة (α، β، وγ) بشكل أساسي بالهيتروكروماتين المركزي؛ ومع ذلك، يتواجد HP1β وγ أيضًا في مواقع الكروماتين الحقيقي في الجينوم (2، 3). يبلغ وزن بروتينات HP1 حوالي 25 كيلو دالتون، وتحتوي على نطاق كرومودومين أميني طرفي محفوظ، يليه منطقة مفصلية متغيرة ونطاق كروموشادو كربوكسيلي طرفي محفوظ. يُسهّل نطاق الكرومودومين الارتباط بالهيستون H3 ثلاثي الميثيل عند Lys9، وهو "علامة" هيستونية ترتبط ارتباطًا وثيقًا بالهيتروكروماتين المركزي (4، 5). ترتبط المنطقة المفصلية المتغيرة بكل من الحمض النووي الريبي (RNA) والحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) بطريقة مستقلة عن التسلسل (6). يُسهّل نطاق الكروموشادو عملية ازدواج بروتينات HP1، بالإضافة إلى ارتباطه بالعديد من البروتينات المتورطة في إسكات الجينات وتكوين الكروماتين المغاير، بما في ذلك ناقل ميثيل الهيستون SUV39H، وناقلات ميثيل الحمض النووي DNMT1 وDNMT3a، والوحدة الفرعية p150 لعامل تجميع الكروماتين 1 (CAF-1) (7-9). إلى جانب مساهمتهما في تكوين الكروماتين المغاير وانتشاره، يُوجد كل من HP1 وSUV39H1 مُرتبطين ببروتينات الورم الأرومي الشبكي (Rb) وE2F6، وكلاهما يعمل على كبح نسخ الجينات في الكروماتين الحقيقي في الخلايا الساكنة (10، 11). تخضع بروتينات HP1 لتعديلات ما بعد الترجمة المتعددة، بما في ذلك الفسفرة، والأسيتلة، والمثيلة، واليوبيكويتين، والسومويليشن، مما يُشير إلى وسائل تنظيمية متنوعة (12-14). يُفسفر بروتين HP1γ على الموقع Ser83 بواسطة بروتين كيناز A (PKA)، ويؤدي تنشيط PKA بواسطة فورسكولين ومعالجة IBMX إلى زيادة الفسفرة (14). كما تزداد فسفرة HP1γ على الموقع Ser83 أثناء الانقسام المتساوي، كما يتضح من خلال استخدام الأجسام المضادة لـ Phospho-HP1γ (Ser83)، والتي تُظهر زيادة في التلوين المناعي الفلوري في الخلايا الانقسامية غير المعالجة، وزيادة في إشارة لطخة ويسترن في مستخلصات الخلايا المتوقفة في الانقسام المتساوي نتيجة المعالجة بالباكليتاكسيل. تحدث فسفرة الموقع Ser83 فقط على مجموعة فرعية من HP1γ الموجودة في الكروماتين الحقيقي، وتحديدًا HP1γ المرتبط بالمناطق المشفرة للجينات النشطة (14). تُضعف هذه الفسفرة قدرة HP1γ على كبح النسخ، وقد تكون مؤشرًا على استطالة النسخ (14). أسماء بديلة CBX3؛ كروموبوكس 3؛ نظير كروموبوكس 3 (نظير HP1 غاما، ذبابة الفاكهة)؛ نظير بروتين كروموبوكس 3؛ HECH؛ نظير بروتين هيتروكروماتين 1 غاما؛ بروتين هيتروكروماتين HP1 غاما؛ بروتين شبيه بهيتروكروماتين 1؛ HP1 غاما؛ نظير HP1 غاما؛ HP1-غاما؛ HP1Hs-غاما؛ بروتين مُعدِّل 2 مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 22 المصدر: أرنب