CST، 33036L، PTMScan® النوع البري ألفا-لايتيك بروتياز (WaLP)

إنزيم لدراسة بكتيريا البروتياز ألفا-لايتيك في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج يُستخدم إنزيم PTMScan® Wild Type Alpha-Lytic Protease (WaLP) مع بروتوكول PTMScan® الحاصل على براءة اختراع من شركة Cell Signaling Technology في خطوة الهضم البروتيني الأولية. يجب تخفيف العينات في محلول التحلل باليوريا إلى تركيز 2 مولار أو أقل من اليوريا قبل إضافة WaLP. خفف المحلول المركز بتركيز 0.4 ملغم/مل بنسبة 1:100 للهضم النهائي، ثم حضّنه طوال الليل عند درجة حرارة 37 درجة مئوية. قسّم العينة إلى حصص صغيرة وخزّنها عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. راجع مجموعة PTMScan® والبروتوكول الخاص بها لمزيد من التفاصيل حول إنزيم البروتياز المناسب قبل هضم أي عينات بروتينية. تخزين هذا المنتج يبقى صالحاً لمدة 12 شهراً عند تخزينه في درجة حرارة -20 درجة مئوية. يُنصح بتقسيمه إلى حصص صغيرة لتجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. النوعية / الحساسية المصدر / التنقية تم إنتاج WaLP بشكل معاد التركيب في ، وتم تنقيته ويتم توفيره في 10 ملي مولار من أسيتات الصوديوم عند درجة حموضة 5.0. خلفية عُزل إنزيم ألفا-لايتيك بروتياز من النوع البري (WaLP) لأول مرة من بكتيريا الميكسوبكتيريا Lysobacter enzymogenes (1). وهو بروتياز يقوم بقطع البروتينات بعد بقايا الأحماض الأمينية A وS وT وV، مما يجعله بديلاً مفيداً في تطبيقات علم البروتينات. يُعبَّر عن الشكل الأولي للإنزيم على هيئة بروتين مكون من 397 حمضًا أمينيًا، والذي يُشطر إلى بروتين ناضج مكون من 198 حمضًا أمينيًا. نُشرت العديد من الدراسات حول الشكل الناضج والموقع النشط وآلية التحفيز (2، 3). وبناءً على دراسات التركيب البلوري، يبدو أن هناك علاقة وثيقة بينه وبين بروتيازات السيرين البنكرياسية الأخرى (4). إن خصوصية الانقسام البديل لـ WaLP مفيدة بشكل خاص للنظر في علم البروتينات لتعديلات SUMO حيث يقوم بفصل بروتين SUMO تاركًا نمطًا ثنائي الجليسين يمكن بعد ذلك اكتشافه باستخدام الجسم المضاد الخاص بـ SUMO Branch Motif remnant (K-ε-GG) (5). أسماء بديلة ألفا ليتيك؛ بروتياز؛ والپ