Product Description
جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة CTCF. مُعتمد للاستخدام في تقنيات WB، وIP، وIHC، وIF، وChIP، وC&R، وC&T. متوفر بثلاثة أحجام. يتميز الجسم المضاد أحادي النسيلة CTCF (D31H2) المُستخلص من الأرانب (CST #3418) بدقة عالية وخضع لاختبارات داخلية صارمة، وهو جاهز للشحن.
معلومات استخدام المنتج
للحصول على أفضل نتائج في تقنية ChIP أو ChIP-seq، استخدم 10 ميكرولتر من الجسم المضاد و10 ميكروغرام من الكروماتين (ما يعادل تقريبًا 4 × 10⁶ خلية) لكل عملية ترسيب مناعي. تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد باستخدام مجموعات SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP. تم تحديد تخفيف CUT&RUN باستخدام مجموعة CUT&RUN Assay Kit رقم 86652. تم تحديد تخفيف CUT&Tag باستخدام مجموعة CUT&Tag Assay Kit رقم 77552.
اللطخة الغربية: 1:1000
الترسيب المناعي: 1:50
الكيمياء المناعية النسيجية (البارافين): 1:640 - 1:2560
التألق المناعي (المجمد): 1:200 - 1:800
التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية): 1:400 - 1:1600
كروماتين IP: 1:50
تسلسل الحمض النووي للكروماتين: 1:50
قطع وهروب: 1:50
قص ولصق: 1:50
تخزين
يُباع في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. للحصول على نسخة خالية من الحامل (خالية من ألبومين المصل البقري والأزيد)، يُرجى مراجعة المنتج رقم 48859.
بروتوكول
البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، الترسيب المناعي، الكيمياء النسيجية المناعية (البارافين)، التألق المناعي (المجمد)، التألق المناعي (الكيمياء الخلوية المناعية)، ترسيب الكروماتين المناعي، تسلسل ترسيب الكروماتين المناعي، CUT&RUN، CUT&Tag
النوعية / الحساسية
يكشف الجسم المضاد أحادي النسيلة CTCF (D31H2) المُستخلص من الأرانب عن المستويات الذاتية لبروتين CTCF الكلي. لا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع BORIS. كما يقوم هذا الجسم المضاد بتحديد الصفيحة المخصوصة للأمعاء الدقيقة في أنسجة الفئران المجمدة والمثبتة باستخدام تقنية التألق المناعي.
التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد
المصدر / التنقية
يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع الطرف الكربوكسيلي لبروتين CTCF البشري.
خلفية
يُعدّ عامل الربط CCCTC (CTCF) ونظيره، شقيق منظم المواقع المطبوعة (BORIS)، من عوامل النسخ المحفوظة للغاية التي تنظم تنشيط وتثبيط النسخ، ووظيفة العزل، ومناطق التحكم في الطباعة الجينية (ICRs) (1-4). على الرغم من اختلاف نهايتيهما الأمينية والكربوكسيلية، يحتوي كلا البروتينين على 11 نطاقًا محفوظًا من أصابع الزنك تعمل معًا للربط بنفس عناصر الحمض النووي (1). يُعبر عن CTCF بشكل واسع ويساهم في تنظيم نسخ الجينات المنظمة لنمو الخلايا، بما في ذلك (1). كما يرتبط CTCF أيضًا بجميع عناصر العزل ومناطق التحكم في الطباعة الجينية المعروفة، بما في ذلك H19/IgF2، ومتلازمة برادر-ويلي/أنجلمان، وموقع النسخ المضاد الخاص بالكروموسوم X غير النشط (XIST)، وهو ضروري لنشاط حجب المعزز لهذه العناصر (5-7). يتأثر ارتباط CTCF بالحمض النووي بمَثْيَلَة الحمض النووي، وهي علامة تحدد اختيار الأليل المطبوع (الأمومي مقابل الأبوي) (1). تُنظَّم وظائف CTCF المختلفة بواسطة تعديلين ما بعد الترجمة على الأقل. يُعدّ إضافة عديد (ADP-ribosyl) إلى CTCF ضروريًا لوظيفته العازلة (8). يُسهّل فسفرة Ser612 بواسطة بروتين كيناز CK2 تحويل CTCF من مثبط نسخ إلى مُنشِّط عند مُحفِّز c-Myc (9). وُجدت طفرات أو حذف في العديد من أورام الثدي والبروستاتا وورم ويلمز (10، 11). يقتصر التعبير عن BORIS على الخلايا المنوية الأولية، وهو مُنفصل عن CTCF (3). في الخلايا التي تُعبِّر عن BORIS، تكون مُحفِّزات مستضدات سرطان الخصية المرتبطة بالكروموسوم X، مثل MAGE-A1، منزوعة المَثْيَلَة ومُنشَّطة، ولكنها تكون مُثْيَلَة وغير نشطة في الخلايا الجسدية التي تُعبِّر عن CTCF (12). مثل البروتينات الأخرى الخاصة بالخصية، يتم التعبير عن BORIS بشكل غير طبيعي في أنواع مختلفة من السرطانات، مثل سرطان الثدي، وله ألفة أكبر من CTCF لمواقع ربط الحمض النووي، مما يقلل من نشاط CTCF المحتمل في كبح الورم (1،3،13،14).
أسماء بديلة
مثبط النسخ ذو 11 إصبع زنك؛ بروتين ذو 11 إصبع زنك؛ عامل ربط CCCTC؛ عامل ربط CCCTC (بروتين ذو إصبع زنك)؛ CFAP108؛ CTCF؛ نظير CTCFL؛ FAP108؛ MRD21؛ مثبط النسخ CTCF
مواصفة
التفاعل: HMR Mk
الحساسية: داخلية المنشأ
الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 140
المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924