CST، 35030C، مجموعة اختبار اليوبيكويتين TUBE-UBQLN1 متعددة الفروع (مضاد IgG ثانوي للفأر)

مجموعة أدوات ELISA للدراسة في مجال البحث. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: ELISA+ النوعية / الحساسية تم إنتاج بروتين اليوبيكويتين متعدد الفروع TUBE-UBQLN1، المصمم من نطاق ربط اليوبيكويتين الخاص بـ UBQLN1، في التفاعل مع الأنواع: من المتوقع أن يتفاعل مع جميع الأنواع خلفية اليوبيكويتين وحدة ببتيدية محفوظة تلعب دورًا هامًا في مسار اليوبيكويتين-بروتيازوم. يرتبط اليوبيكويتين تساهميًا بالعديد من البروتينات الخلوية عبر عملية اليوبيكويتين، التي تستهدف البروتينات لتحللها بواسطة البروتيازوم 26S. تتضمن عملية اقتران اليوبيكويتين بالبروتين المستهدف ثلاثة مكونات. يُنشط اليوبيكويتين أولًا بتكوين معقد ثيول إستر مع مكون التنشيط E1؛ ثم يُنقل اليوبيكويتين المنشط إلى بروتين حامل اليوبيكويتين E2، ومن E2 إلى إنزيم ربط اليوبيكويتين E3 لتوصيله النهائي إلى مجموعة الأمين الطرفية (ε-NH) لبقايا الليسين (1-3) في البروتين المستهدف. وقد ثبت تورط مسار اليوبيكويتين-بروتيازوم في نطاق واسع من العمليات البيولوجية الطبيعية وفي التشوهات المرتبطة بالأمراض. أظهرت العديد من البروتينات، مثل IκB وp53 وcdc25A وBcl-2، أنها أهداف لعملية اليوبيكويتين-البروتيازوم كجزء من تنظيم تقدم دورة الخلية، والتمايز، والاستجابة للإجهاد الخلوي، والاستماتة (4-7). ترتبط البروتينات الركيزة باليوبيكويتين باستخدام سبعة بقايا ليسين مميزة (Lys6، Lys11، Lys27، Lys29، Lys33، Lys48، وLys63). يتشكل سلسلة متعددة اليوبيكويتين عندما يرتبط بقايا ليسين من اليوبيكويتين بالجليسين الطرفي الكربوكسيلي ليوبيكويتين آخر. تُظهر البروتينات متعددة اليوبيكويتين عند بقايا ليسين محددة ميلًا لأن تكون هدفًا لعمليات مختلفة. تستهدف سلاسل البولي يوبيكويتين المرتبطة بـ K48 البروتينات بشكل أساسي للتحلل البروتيني بواسطة البروتيازوم، بينما تنظم سلاسل البولي يوبيكويتين المرتبطة بـ K63 وظيفة البروتين، وموقعه داخل الخلية، أو تفاعلاته مع البروتينات الأخرى (8). وتؤدي سلاسل البولي يوبيكويتين المرتبطة بـ K63 وظائف غير بروتينية، مثل نقل البروتين، وتنشيط الكيناز/الفوسفاتاز، والتحكم في تلف الحمض النووي، وكلها قد تكون مهمة في تنظيم بقاء السرطان وتطوره (9، 10). تُعد نطاقات اليوبيكويتين المرتبطة (UBA) مناطق بروتينية تتفاعل مع اليوبيكويتين. وقد صُممت كيانات ربط اليوبيكويتين المتكررة (TUBEs) باستخدام أربعة نطاقات UBA متكررة، استنادًا إلى نظرية أن سلاسل رباعي اليوبيكويتين هي الحد الأدنى المطلوب للتحلل البروتيني الفعال بواسطة البروتيازوم (11). ترتبط الأنابيب المصممة بمجالات UBA من UBQLN1 و RAD23A بسلاسل رباعي اليوبيكويتين المرتبطة بـ K48 و K63 ويمكن استخدامها لتنقية البروتينات الميوبيكويتينية بكفاءة من مستخلصات الخلايا (12). مواصفة التفاعل: الكل