CST، 36104S، فيرو أورانج

أصباغ خلوية للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج تحضير الكاشف: تظهر المادة على شكل مادة صلبة/غشاء شفاف إلى أبيض يصعب رؤيته داخل الأنبوب، وقد تتكتل داخل الغطاء. لضمان احتواء المادة داخل القارورة، قم بتدوير أنبوب فيروأورانج المجفف بالتجميد في جهاز الطرد المركزي بعد وصوله إلى درجة حرارة الغرفة وقبل إعادة تكوينه. لتحضير محلول فيروأورانج بتركيز 1 ملي مول/لتر، امزج 35 ميكرولتر من ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) مع 24 ميكروغرام من فيروأورانج، ثم قم بالسحب والضخ المتكرر باستخدام الماصة حتى يذوب. لتحضير محلول فيروأورانج بتركيز 1 ميكرومول/لتر، خفف محلول فيروأورانج بتركيز 1 ملي مول/لتر بنسبة 1:1000 في محلول هانكس المتوازن للأملاح (HBSS). احفظه بعيدًا عن الضوء. هام: يمكن استخدام ثنائي ميثيل فورماميد (DMF) أو الإيثانول كبديل لثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO). يمكن استخدام وسط خالٍ من المصل كبديل لمحلول هانكس المتوازن للأملاح (HBSS). لا يمكن استخدام وسط يحتوي على المصل لأنه سيولد إشارة خلفية عالية. يكون المحلول بتركيز 1 ملي مول/لتر مستقرًا لمدة شهر واحد عند درجة حرارة -20 درجة مئوية مع حمايته من الضوء. أما المحلول بتركيز 1 ميكرومول/لتر فهو غير مستقر، ويجب تحضيره واستخدامه مباشرةً قبل إجراء التجربة. ملاحظة: عند العمل مع الخلايا المعلقة، من الضروري ترسيب الخلايا بالطرد المركزي اللطيف قبل جميع خطوات الغسل والشفط. البروتوكول: 1. ازرع الخلايا حسب الحاجة، وقم بإجراء المعالجات اللازمة. 2. اشفط السائل الطافي. 3. اغسل الخلايا ثلاث مرات بمحلول HBSS أو وسط خالٍ من المصل. 4. أضف محلول FerroOrange بتركيز 1 ميكرومول/لتر إلى الخلايا، واحضنها لمدة 30 دقيقة. 5. افحص الخلايا باستخدام المجهر الفلوري. راجع قسم الخصائص الفلورية للاطلاع على أطياف الإثارة والانبعاث. 6. لتحليل الخلايا باستخدام قياس التدفق الخلوي، افصل الخلايا الملتصقة أو اجمع الخلايا المعلقة. حلل الخلايا باستخدام جهاز قياس التدفق الخلوي عند الكثافة الخلوية المطلوبة. تخزين يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية في مكان جاف بعيدًا عن الضوء والمعادن. يبقى المنتج مستقرًا لمدة 12 شهرًا في حالته المجففة بالتجميد. بعد إذابته بتركيز 1 ملي مول/لتر، يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية بعيدًا عن الضوء والمعادن، ويُستخدم خلال شهر واحد.