CST، 4083S، DAPI

أصباغ خلوية للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج طريقة الاستخدام: يُقدّم DAPI على شكل مسحوق مُجفّف بالتجميد. لتحضير محلول تركيزه 20 ملغم/مل، يُذاب 1 ملغم في 50 ميكرولتر من الماء منزوع الأيونات أو ثنائي ميثيل فورماميد. يُرجى اتباع بروتوكولات التألق المناعي والتدفق الموصى بها من قِبل CST. في كلا التطبيقين، بعد الكشف الثانوي: التألق المناعي: التلوين المضاد باستخدام DAPI كخطوة أخيرة في عملية التلوين. اشطف العينات مرتين بمحلول الفوسفات الملحي (PBS) لمدة خمس دقائق في كل مرة. خفّف محلول DAPI المركز إلى تركيز يتراوح بين 1 و0.1 ميكروغرام/مل في محلول الفوسفات الملحي (PBS) واحضنه لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة في الظلام. اشطف العينات مرة واحدة بمحلول الفوسفات الملحي (PBS) ثم جهّزها للتصوير. افحصها فورًا باستخدام طول موجة الإثارة المناسب. بدلاً من ذلك، خفّف محلول DAPI المركز إلى تركيز يتراوح بين 1 و0.1 ميكروغرام/مل في وسط التثبيت، ثم ضعه على الخلايا، وجهّزها للتصوير. افحصها فورًا باستخدام طول موجة الإثارة المناسب. قياس التدفق الخلوي: اشطف العينات مرة واحدة في محلول الحضانة. خفف محلول DAPI المركز إلى تركيز يتراوح بين 1.60 و0.400 ميكروغرام/مل في محلول ملحي فوسفاتي، ثم حضّن لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام قبل تحليل الخلايا باستخدام جهاز قياس التدفق الخلوي. تخزين يُحفظ المنتج مجففًا بالتجميد أو في محلول عند درجة حرارة 4 درجات مئوية في مكان جاف. يُحفظ بعيدًا عن الضوء. يبقى المنتج المجفف بالتجميد مستقرًا لمدة 24 شهرًا. أما في حالته السائلة، فيُستخدم خلال أسبوعين إلى ثلاثة أسابيع للحفاظ على فعاليته. للتخزين طويل الأمد، يُقسّم المنتج إلى حصص صغيرة ويُحفظ عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لتجنب تكرار دورات التجميد والذوبان. خلفية يُعدّ 4'،6-ثنائي أميدينو-2-فينيل إندول، ثنائي هيدروكلوريد (DAPI) صبغةً زرقاء فلورية للحمض النووي تستهدف تجمعات AT المزدوجة في الأخدود الصغير للحمض النووي (1). يرتبط جزيء واحد من الصبغة بكل 3 أزواج قاعدية من الحمض النووي المزدوج، مما يُؤدي إلى زيادة في الفلورة بمقدار 20 ضعفًا تقريبًا (2). يتناسب مستوى فلورة DAPI-DNA طرديًا مع محتوى الحمض النووي (3). أسماء بديلة أصباغ خلوية؛ صبغة الحمض النووي