مجموعة CST، 4652S، PTMScan® Phospho-MAPK/CDK Substrate Motif (PXS*P و S*PXK/R)

برنامج PTMScan للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج تُحلل الخلايا في محلول منظم يحتوي على اليوريا، وتُهضم البروتينات الخلوية بواسطة إنزيمات البروتياز، ثم تُنقى الببتيدات الناتجة باستخدام استخلاص الطور الصلب ذي الطور المعكوس. بعد ذلك، تُخضع الببتيدات لتنقية المناعة باستخدام جسم مضاد PTMScan® Motif مرتبط بخرزات بروتين A أجاروز. تُزال الببتيدات غير المرتبطة بالغسل، وتُستخلص الببتيدات الحاملة لتعديلات ما بعد الترجمة (PTM) باستخدام حمض مخفف. تُجرى عملية تنقية الطور المعكوس على رؤوس دقيقة لإزالة الأملاح وفصل الببتيدات عن الجسم المضاد قبل تركيز الببتيدات المُثرية لتحليلها بتقنية LC-MS/MS. توصي شركة CST باستخدام محلول PTMScan® IAP رقم 9993 المرفق مع المجموعة. تخزين تُزوَّد حبيبات الأجسام المضادة في محلول منظم IAP يحتوي على 50% جلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: PTMScan خلفية تلعب عائلتا كينازات البروتين سيرين/ثريونين MAPK وCDK أدوارًا مهمة في تكاثر الخلايا وتنظيم دورة الخلية. تقوم هذه الكينازات بفسفرة الثريونين أو السيرين متبوعًا ببقايا البرولين (2-4). يقوم MAPK بفسفرة الركائز ذات التسلسل المتفق عليه PX(S/T)P، بينما يقوم CDK بفسفرة الركائز التي تحتوي على التسلسل المتفق عليه (S/T)PXK/R. تم تطوير الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب رقم 2325، الموجود في هذه المجموعة، في شركة CST لاستخدامه في دراسة واكتشاف ركائز جديدة لـ MAPK وCDK (5،6). في هذا الاختبار، PTMScan (PXS أسماء بديلة عزر