CST، 54937S، جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب للهيستون H2A.X (D17A3) (مُبَيتَنَة)

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة H2AX. تم التحقق من صحته لتقنية Western Blotting. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة من الأرانب (المُبَيتَنَة) (CST #54937) بدرجة عالية من الخصوصية، وقد تم التحقق من صحته بدقة داخل الشركة، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج اللطخة الغربية: 1:1000 تخزين يُزوَّد هذا المنتج بمحلول يحتوي على 140 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و3 ملي مولار من كلوريد البوتاسيوم، و10 ملي مولار من فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة (الأس الهيدروجيني 7.4)، و2 ملي مولار من فوسفات البوتاسيوم أحادي القاعدة، و2 مليغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب (المُؤَشَّر بالبيوتين) للهيستون H2A.X (D17A3) على المستويات الطبيعية لبروتين الهيستون H2A.X الكلي. ولا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع بروتينات الهيستون H2A الأخرى. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع البقايا المحيطة بـ Val124 من بروتين الهيستون البشري H2A.X. خلفية يُعدّ الهيستون H2A.X نوعًا مُتغيرًا من الهيستون، ويُمثّل حوالي 10% من إجمالي بروتينات الهيستون H2A في الخلايا الليفية البشرية الطبيعية (1). يُعدّ H2A.X ضروريًا لتوقف دورة الخلية بوساطة نقاط التفتيش، ولإصلاح الحمض النووي بعد حدوث كسور في سلسلتي الحمض النووي (1). يؤدي تلف الحمض النووي، الناتج عن الإشعاع المؤين أو الأشعة فوق البنفسجية أو العوامل المُحاكية للإشعاع، إلى فسفرة سريعة لـ H2A.X عند Ser139 بواسطة كينازات شبيهة بـ PI3K، بما في ذلك ATM وATR وDNA-PK (2، 3). في غضون دقائق من تلف الحمض النووي، يُفسفر H2A.X عند Ser139 في مواقع التلف لتكوين γ-H2A.X (4). يُعدّ هذا الحدث المُبكر جدًا في استجابة تلف الحمض النووي ضروريًا لاستقطاب العديد من بروتينات استجابة تلف الحمض النووي، بما في ذلك MDC1 وNBS1 وRAD50 وMRE11 و53BP1 وBRCA1 (1). بالإضافة إلى دوره في إصلاح تلف الحمض النووي، يُعدّ H2A.X ضروريًا لتفتيت الحمض النووي أثناء موت الخلايا المبرمج، ويتم فسفرته بواسطة كينازات مختلفة استجابةً لإشارات موت الخلايا المبرمج. يُفسفر H2A.X عند Ser139 بواسطة DNA-PK استجابةً لتنشيط مستقبلات موت الخلايا، وكيناز c-Jun الطرفي N (JNK1) استجابةً للتعرض للأشعة فوق البنفسجية A، وكيناز p38 MAPK استجابةً لنقص المصل (5-8). يُفسفر H2A.X بشكلٍ دائم على Tyr142 في الخلايا غير المتضررة بواسطة WSTF (عامل النسخ لمتلازمة ويليامز-بورين) (9، 10). عند تلف الحمض النووي، وبالتزامن مع فسفرة Ser139، يُزال الفسفرة من Tyr142 في مواقع تلف الحمض النووي بواسطة فوسفاتازات EYA1 وEYA3 المُستقطبة (9). بينما يُسهّل الفسفرة عند Ser139 استقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي وبروتينات الاستماتة إلى مواقع تلف الحمض النووي، يبدو أن الفسفرة عند Tyr142 هي التي تُحدد مجموعة البروتينات التي يتم استقطابها. تُثبّط فسفرة H2A.X عند Tyr142 استقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي، وتُعزز ارتباط عوامل الاستماتة مثل JNK1 (9). تُظهر الخلايا الليفية الجنينية للفئران التي تُعبّر فقط عن H2A.X Y142F الطافر، الذي يُفضّل استقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي على بروتينات الاستماتة، استجابة استماتة مُخفّضة للإشعاع المؤين (9). بالتالي، يبدو أن توازن فسفرة وإزالة فسفرة H2A.X عند Tyr142 يُوفّر آلية تحويل لتحديد مصير الخلية بعد تلف الحمض النووي. أسماء بديلة عضو X من عائلة الهيستون H2A؛ عضو X من عائلة الهيستون H2A؛ H2A.X؛ هيستون متغير H2A.X؛ H2a/x؛ H2AFX؛ H2AX؛ هيستون H2AX؛ هيستون H2A.x؛ هيستون H2AX مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 15 المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب