CST, 5546S, Ubiquityl-Histone H2B (Lys120) (D11) جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة يوبيكويتينات الهيستون H2B (Lys120). مُعتمد للاستخدام في تقنيات WB وIF وF وChIP. متوفر بحجمين. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة المُستخلص من الأرانب والمُخصص لدراسة يوبيكويتينات الهيستون H2B (Lys120) (D11) بدرجة عالية من التخصص، وقد خضع لاختبارات داخلية دقيقة، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج للحصول على أفضل نتائج في تقنيتي ChIP و ChIP-seq، استخدم 2.5 ميكرولتر من الجسم المضاد و10 ميكروغرام من الكروماتين (ما يعادل تقريبًا 4 × 10⁶ خلية) لكل عملية ترسيب مناعي. وقد تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد باستخدام مجموعات SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits. اللطخة الغربية: 1:1000 التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية): 1:800 - 1:3200 قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ): 1:400 - 1:1600 كروماتين IP: 1:200 تسلسل الحمض النووي للكروماتين: 1:200 تخزين يُباع في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. للحصول على نسخة خالية من الحامل (خالية من ألبومين المصل البقري والأزيد)، يُرجى مراجعة المنتج رقم 33291. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية)، قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ)، ترسيب الكروماتين المناعي، تسلسل ترسيب الكروماتين المناعي النوعية / الحساسية يكشف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب Ubiquityl-Histone H2B (Lys120) (D11) عن المستويات الداخلية لبروتين الهيستون H2B فقط عند إضافة اليوبيكويتين إليه على Lys120. ولا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع البروتينات الأخرى الميوبيكويتينية أو اليوبيكويتين الحر. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع الطرف الكربوكسيلي لبروتين الهيستون H2B البشري الذي يتم فيه إضافة جزيء يوبيكويتين واحد إلى Lys120. خلفية النيوكليوسوم، المكون من أربعة بروتينات هيستون أساسية (H2A، H2B، H3، وH4)، هو الوحدة البنائية الرئيسية للكروماتين. كان يُعتقد في الأصل أن الهيستونات تعمل كدعامة ثابتة لتعبئة الحمض النووي، ولكن تبين الآن أنها بروتينات ديناميكية تخضع لأنواع متعددة من التعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الأسيتلة، والفسفرة، والمثيلة، واليوبيكويتين (1). اليوبيكويتين هو وحدة ببتيدية محفوظة مكونة من 76 حمضًا أمينيًا، ويمكن ربطها تساهميًا بالعديد من البروتينات الخلوية من خلال عملية اليوبيكويتين. تشارك ثلاثة مكونات في عملية اقتران البروتين باليوبيكويتين هذه. يتم تنشيط اليوبيكويتين أولاً عن طريق تكوين مركب ثيول إستر مع مكون التنشيط E1؛ يُنقل اليوبيكويتين المُنشَّط لاحقًا إلى بروتين حامل اليوبيكويتين E2، ثم من E2 إلى إنزيم ربط اليوبيكويتين E3 لتوصيله النهائي إلى مجموعة ε-NH لبقايا الليسين في البروتين المستهدف (2). يُضاف جزيء يوبيكويتين واحد إلى الهيستون H2B على الليسين 120 أثناء تنشيط النسخ بواسطة بروتين RAD6 E2 بالاشتراك مع إنزيم ربط اليوبيكويتين BRE1A/BRE1B E3 (المعروف أيضًا باسم RNF20/RNF40) (3). يتم استقطاب مُركَّب RAD6/BRE1 إلى مُحفِّزات الجينات أثناء التنشيط بواسطة مُركَّب PAF، وهو مُركَّب بروتيني مُرتبط بإنزيم بوليميراز الحمض النووي الريبي II، والذي يُنظِّم استطالة النسخ (3-5). يرتبط الليسين 120 من الهيستون H2B المُضاف إليه جزيء يوبيكويتين واحد بالمنطقة المنسوخة من الجينات النشطة (3، 6). يحفز إضافة جزيء يوبيكويتين واحد إلى الهيستون H2B استطالة النسخ عن طريق تسهيل إعادة تشكيل الكروماتين المعتمدة على FACT (7، 8). إضافةً إلى ذلك، يُعدّ هذا الإضافة ضروريًا لمثيلة الليسين 4 و79 في الهيستون H3، وهما تعديلان إضافيان للهيستون ينظمان بدء النسخ واستطالته (9). ومن المثير للاهتمام أن إزالة اليوبيكويتين من الليسين 120 في الهيستون H2B بواسطة USP22، وهي وحدة فرعية من مركب أسيتيل ترانسفيراز الهيستون SAGA البشري، خطوة ضرورية في تنشيط النسخ (10). وبالتالي، يبدو أن حالة إضافة اليوبيكويتين إلى الهيستون H2B ديناميكية أثناء النسخ، وقد تُشكّل خطوة وسيطة في تنشيطه. أسماء بديلة H2B؛ الهيستون 3 المتجمع H2B؛ عائلة الهيستون H2B، العضو F؛ الهيستون 3 المتجمع H2B؛ H2B.1؛ H2B/f؛ H2B1B؛ H2BC3؛ H2BFF؛ HIST1H2BB؛ الهيستون 1، H2bb؛ مجموعة الهيستون 1، العضو b من عائلة H2B؛ مجموعة الهيستون 1، H2bb؛ الهيستون H2B من النوع 1-B؛ الهيستون H2B.1؛ الهيستون H2B.f؛ MGC119804 مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 23 المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب