CST، 6213S، SignalSilence® LC3B siRNA II

استخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) لدراسة LC3B في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® LC3B siRNA II قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية الالتهام الذاتي عملية هدمية لتفكيك محتويات السيتوبلازم عبر الجسيمات الالتهامية الذاتية والجسيمات الحالة (1، 2). يُنشط الالتهام الذاتي عادةً في حالات نقص المغذيات، ولكنه يرتبط أيضًا بعدد من العمليات الفيزيولوجية، بما في ذلك النمو، والتمايز، والأمراض التنكسية العصبية، والعدوى، والسرطان (3). تم تحديد سلسلة الضوء 3 (LC3)، وهي مؤشر للالتهام الذاتي، في الأصل كوحدة فرعية من البروتينات المرتبطة بالأنيبيبات الدقيقة 1A و1B (المسماة MAP1LC3) (4)، ثم وُجد لاحقًا أنها تُظهر تشابهًا مع بروتين الخميرة Apg8/Aut7/Cvt5 الضروري للالتهام الذاتي (5). تخضع ثلاثة نظائر بشرية من LC3 (LC3A وLC3B وLC3C) لتعديلات ما بعد الترجمة أثناء الالتهام الذاتي (6-9). يؤدي انقسام LC3 عند الطرف الكربوكسيلي مباشرةً بعد التخليق إلى إنتاج الشكل السيتوبلازمي LC3-I. أثناء عملية الالتهام الذاتي، يتحول LC3-I إلى LC3-II عبر عملية إضافة الدهون بواسطة نظام شبيه باليوبيكويتين يشمل Atg7 وAtg3، مما يسمح لـ LC3 بالارتباط بالحويصلات الالتهامية الذاتية (6-10). وقد استُخدم وجود LC3 في الجسيمات الالتهامية الذاتية وتحول LC3 إلى الشكل الأقل هجرة، LC3-II، كمؤشرات على الالتهام الذاتي (11). أسماء بديلة lc3؛ lc3-b مواصفة التفاعل: H