CST، 6222S، SignalSilence® Beclin-1 siRNA I

استخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) لدراسة بروتين بيكلين 1 في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® Beclin-1 siRNA I قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية الالتهام الذاتي عملية هدمية لتحلل البروتينات عبر الجسيمات الالتهامية الذاتية والجسيمات الحالة، وتُفعَّل استجابةً لنقص المغذيات وفي حالات التنكس العصبي (1). أحد البروتينات الأساسية لهذه العملية هو بيكلين-1، وهو النظير الثديي لبروتين الالتهام الذاتي Apg6/Vps30 في الخميرة (2). يستطيع بيكلين-1 تعويض عيوب الالتهام الذاتي في الخميرة الناتجة عن فقدان Apg6، كما يمكنه تحفيز الالتهام الذاتي عند فرط التعبير عنه في خلايا الثدييات (3). عُزل بيكلين-1 في الثدييات لأول مرة باستخدام فحص التفاعل الثنائي في الخميرة للبروتينات المتفاعلة مع Bcl-2، وقد ثبت تفاعله مع Bcl-2 وBcl-xL، ولكنه لا يتفاعل مع Bax أو Bak (4). على الرغم من أن بيكلين-1 يُعبَّر عنه بشكل عام في جميع أنحاء الجسم، فقد أظهرت الدراسات البحثية أنه يُحذف أحادي الأليل في 40-75% من حالات سرطان الثدي والمبيض البشري المتفرقة (5). يتمركز بروتين بيكلين-1 داخل تراكيب سيتوبلازمية، بما في ذلك الميتوكوندريا، على الرغم من أن الإفراط في التعبير عنه يُظهر بعض التلوين النووي والتصدير النووي المعتمد على CRM1 (6). وقد أثبت الباحثون أن فئران بيكلين-1 تموت في مراحل مبكرة من التكوين الجنيني، وأن لديها معدلًا مرتفعًا من الأورام التلقائية. تُظهر الخلايا الجذعية من هذه الفئران استجابةً ذاتيةً متغيرة، على الرغم من أن الاستجابات للاستماتة الخلوية بدت طبيعية (7). كما وجد الباحثون أن الإفراط في التعبير عن بيكلين-1 في الخلايا العصبية المصابة بالفيروس أدى إلى حماية كبيرة ضد المرض الناجم عن فيروس سندبيس والاستماتة الخلوية العصبية (4). مواصفة التفاعل: H