CST، 6286S، SignalSilence® Atg14 siRNA I

استخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) لدراسة ATG14 في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® Atg14 siRNA I قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية الالتهام الذاتي عملية هدمية لتفكيك محتويات السيتوبلازم عبر الجسيمات الذاتية والليزوزومات (1، 2). يُنشط الالتهام الذاتي عادةً في حالات نقص المغذيات، ولكنه يرتبط أيضًا بعدد من العمليات الفيزيولوجية، بما في ذلك النمو، والتمايز، والتنكس العصبي، والعدوى، والسرطان (3). اكتُشفت الآلية الجزيئية للالتهام الذاتي في الخميرة، وتُوجّه بواسطة عدد من الجينات المرتبطة بالالتهام الذاتي (Atg). تُشارك هذه البروتينات في تكوين الجسيمات الذاتية، وهي فجوات سيتوبلازمية تُنقل إلى الليزوزومات لتفكيكها. يُنظم إنزيم فوسفاتيديل إينوزيتول 3-كيناز (PI3K) من النوع الثالث، المسمى Vps34، حركة الفجوات والالتهام الذاتي (4، 5). ترتبط بروتينات متعددة بـ Vps34، بما في ذلك p105/Vps15، وBeclin-1، وUVRAG، وAtg14، وRubicon، لتحديد وظيفة Vps34 (6-12). تم تحديد بروتينَي Atg14 وRubicon بناءً على قدرتهما على الارتباط ببروتين Beclin-1 والمشاركة في مركبات فريدة ذات وظائف متضادة (9-12). يثبط Rubicon، الذي يتمركز في الإندوسوم والليزوزوم، نشاط إنزيم Vps34 الدهني؛ ويؤدي تثبيط Rubicon إلى تعزيز الالتهام الذاتي والنقل الإندوسيتوزي (11، 12). في المقابل، يتمركز Atg14 في الأوتوفاجوسومات، والأغشية العازلة، والشبكة الإندوبلازمية، ويمكنه تعزيز نشاط Vps34. ويؤدي تثبيط Atg14 إلى تثبيط الالتهام الذاتي الناجم عن الجوع (11، 12). مواصفة التفاعل: H