CST، 6394S، SignalSilence® SQSTM1/p62 siRNA I

استخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) لدراسة SQSTM1 في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® SQSTM1/p62 siRNA I قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية يُعدّ سيكويستوسوم 1 (SQSTM1، p62) بروتينًا رابطًا لليوبيكويتين، ويشارك في إشارات الخلية، والإجهاد التأكسدي، والالتهام الذاتي (1-4). وقد تمّ التعرف عليه لأول مرة كبروتين يرتبط بنطاق SH2 الخاص بـ p56Lck (5)، ووُجد بشكل مستقل أنه يتفاعل مع PKCζ (6،7). لاحقًا، تبيّن أن SQSTM1 يتفاعل مع اليوبيكويتين، موفرًا دعامة للعديد من بروتينات الإشارة، ومحفزًا تحلل البروتينات عبر البروتيازوم أو الليزوزوم (8). يؤدي التفاعل بين SQSTM1 وTRAF6 إلى إضافة سلاسل متعددة من اليوبيكويتين المرتبط بـ K63 إلى TRAF6، وما يتبع ذلك من تنشيط مسار NF-κB (9). يمكن تحلل تجمعات البروتين التي يُشكّلها SQSTM1 بواسطة الأوتوفاجوسوم (4،10،11). يرتبط بروتين SQSTM1 ببروتين غشاء الأوتوفاجوسوم LC3/Atg8، ناقلاً تجمعات البروتين الحاوية على SQSTM1 إلى الأوتوفاجوسوم (12). يؤدي التحلل الليزوزومي للأوتوفاجوسومات إلى انخفاض مستويات SQSTM1 أثناء عملية الالتهام الذاتي؛ في المقابل، تعمل مثبطات الالتهام الذاتي على تثبيت مستويات SQSTM1. وقد أظهرت الدراسات وجود صلة بين SQSTM1 والإجهاد التأكسدي. يتفاعل SQSTM1 مع KEAP1، وهو مثبط سيتوبلازمي لـ NRF2، وهو عامل نسخ رئيسي يشارك في الاستجابات الخلوية للإجهاد التأكسدي (3). وبالتالي، يمكن أن يؤدي تراكم SQSTM1 إلى زيادة نشاط NRF2. مواصفة التفاعل: H