CST، 68135T، يوبيكويتين-هيستون H2A.Z (Lys120) (E6G7X) جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة يوبيكويتينات H2AZ (Lys120). مُعتمد للاستخدام في تقنيات Western Blotting و Chromatin IP و Chromatin IP-seq. متوفر بحجمين. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب (E6G7X) المُخصص لدراسة يوبيكويتينات الهيستون H2A.Z (Lys120) (CST #68135) بدقة عالية وتخصص مُعتمد داخليًا، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج للحصول على أفضل نتائج في تقنيتي ChIP وChIP-seq، استخدم 10 ميكرولتر من الجسم المضاد و10 ميكروغرام من الكروماتين (ما يعادل تقريبًا 4 × 10⁶ خلية) لكل عملية ترسيب مناعي. وقد تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد باستخدام مجموعات SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP Kits. اللطخة الغربية: 1:1000 كروماتين IP: 1:50 تسلسل الحمض النووي للكروماتين: 1:50 تخزين يُزوَّد في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، ترسيب الكروماتين المناعي، تسلسل ترسيب الكروماتين المناعي النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب (E6G7X) المُستخلص من الأرانب والمُضاد لليوبيكويتين-هيستون H2A.Z (Lys120) على المستويات الطبيعية لبروتين الهيستون H2A.Z فقط عند إضافة اليوبيكويتين إليه عند الموقع Lys120. لا يكشف هذا الجسم المضاد عن الهيستون H2A.Z المُضاف إليه اليوبيكويتين عند الموقع Lys121، ولا عن الهيستون H2A.Z المُضاف إليه اليوبيكويتين المزدوج عند الموقعين Lys120 وLys121. كما لا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع البروتينات الأخرى المُضاف إليها اليوبيكويتين أو مع اليوبيكويتين الحر. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع البقايا المحيطة بـ Lys120 الميوبيكويتين من بروتين الهيستون البشري H2A.Z. خلفية يلعب تعديل بنية الكروماتين دورًا حاسمًا في تنظيم النسخ في حقيقيات النوى. يُعد النيوكليوسوم، المُكوّن من أربعة بروتينات هيستون أساسية (H2A، H2B، H3، وH4)، الوحدة البنائية الرئيسية للكروماتين. بالإضافة إلى العدد المتزايد من تعديلات الهيستون بعد الترجمة التي تُنظّم بنية الكروماتين، يُمكن للخلايا أيضًا استبدال الهيستونات الكلاسيكية بهيستونات مُتغيرة يُمكنها تعديل بنية الكروماتين بشكل مباشر أو غير مباشر (1). هناك خمسة مُتغيرات رئيسية من الهيستون H2A: H2A الكلاسيكي (الأكثر وفرة)، وH2A.X، وMacroH2A، وH2ABbd، وH2A.Z (2). يعمل الهيستون H2A.Z، وهو المُتغير الأكثر حفظًا بين الأنواع، كمنظم إيجابي وسلبي للنسخ، وهو مُهم لاستقرار الكروموسومات (2). أظهرت العديد من المركبات البروتينية المتماثلة، مثل SWR-C وTIP60 وSRCAP (في الثدييات)، قدرتها على تحفيز التبادل المعتمد على ATP للهيستون H2A.Z مع H2A في النيوكليوسوم (3، 4، 5). يُغير هذا التبادل بين متغيرات الهيستون H2A تفاعلات الهيستون-هيستون في لب النيوكليوسوم، ويُغير رقعة حمضية على سطحه، مما يؤدي إلى تغييرات في استقرار النيوكليوسوم وارتباط البروتينات غير الهيستونية مثل HP1α (6، 7). يُعد H2A.Z بروتينًا متغيرًا من الهيستون H2A، وهو ضروري لتنظيم التعبير الجيني بشكل سليم. يتوزع H2A.Z في جميع أنحاء الجينوم، ولكنه يتركز بشكل أكبر عند محفزات ومعززات الجينات النشطة (8). يُؤدي أستلة الهيستون H2A.Z عند المحفزات والمعززات إلى زعزعة استقرار النيوكليوسوم وتأكيد انفتاح الكروماتين، مما يُسهل تنشيط النسخ (9-11). على الرغم من أن معظم الهيستون H2A.Z يبدو مستبعدًا من الكروماتين المغاير التكويني، إلا أنه يوجد في أشكال مختلفة من الكروماتين المغاير الاختياري، بما في ذلك كروموسوم X غير النشط ومحفزات الجينات ثنائية التكافؤ الجاهزة للنسخ (8، 12). في هذه المناطق الكروماتينية المغايرة من الجينوم، يخضع H2A.Z لعملية إضافة جزيء يوبيكويتين واحد على الليسين 120 والليسين 121 بواسطة إنزيم Ring1B ubiquitin ligase الموجود في مُركب Polycomb Repressor Complex 1 (PRC1) (8، 12). تُسهّل عملية إضافة جزيء ميثيل واحد إلى H2A.Z على الليسين 120 والليسين 121 كبح التعبير الجيني عن طريق منع ارتباط بروتين BRD4 المُنشّط وتسهيل استقطاب مُركب Polycomb Repressor Complex 2 (PRC2)، الذي يقوم بدوره بإضافة جزيء ميثيل إلى الهيستون H3 على الليسين 27، مما يُسهّل كبح النسخ (8). أسماء بديلة عضو Z من عائلة الهيستون H2A؛ عضو Z من عائلة الهيستون H2A؛ H2A.z؛ الهيستون المتغير H2A.Z 1؛ H2A.Z-1؛ H2A/z؛ H2AFZ؛ H2AZ؛ هيستون H2AZ؛ H2AZ1؛ هيستون H2A.Z؛ MGC117173 مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 23 المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب