CST, 71630SF, Poly/Mono-ADP Ribose (E6F6A) Rabbit Monoclonal Antibody (BSA and Azide Free)

جسم مضاد أحادي النسيلة للدراسة. مُعتمد للاستخدام في تقنية ويسترن بلوت. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة من الأرانب (E6F6A) عالي التخصص، والمُعتمد داخليًا بدقة، وهو خالٍ من الألبومين البقري والأزيد (رقم CST 71630)، وجاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج هذه التركيبة مثالية للاستخدام مع التقنيات التي تتطلب وسمًا خاصًا أو مخصصًا للأجسام المضادة، بما في ذلك الفلوروفورات والمعادن واللانثانيدات والأوليغونوكليوتيدات. لا يُنصح باستخدامها في فحوصات ChIP وChIP-seq وCUT&RUN وCUT&Tag. إذا كنتم بحاجة إلى تركيبة خالية من الحامل لتحليل الكروماتين، يُرجى التواصل معنا. يجب على المستخدم النهائي تحديد التخفيفات/التركيزات المثلى. تخضع الأجسام المضادة الخالية من الألبومين البقري (BSA) والأزيد لاختبارات مراقبة الجودة باستخدام كروماتوغرافيا الاستبعاد الحجمي (SEC) للتأكد من سلامة الأجسام المضادة. التركيبة متوفر في محلول فوسفات ملحي (PBS) بتركيز 1X (10 ملي مولار Na₂HPO₄، 3 ملي مولار KCl، 2 ملي مولار KH₂PO₄، و140 ملي مولار NaCl (الأس الهيدروجيني 7.8)). خالٍ من الألبومين البقري والأزيد. تخزين يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. يتجمد هذا المنتج عند درجة حرارة -20 درجة مئوية، لذا يُنصح بتقسيمه إلى أجزاء في قوارير للاستخدام الفردي لتجنب تكرار دورات التجميد والذوبان. قد تظهر رواسب طفيفة، ويمكن إذابتها بالرجّ الخفيف. لن يؤثر ذلك على فعالية الأجسام المضادة. النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب متعدد/أحادي ريبوز ADP (E6F6A) (خالي من BSA والأزيد) على المستويات الداخلية للبروتينات ADP ريبوزية ولا يتفاعل بشكل متقاطع مع التعديلات الأخرى بعد الترجمة. التفاعل مع الأنواع: من المتوقع أن يتفاعل مع جميع الأنواع المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بـ KLH المعدل على الليسين بواسطة ADP ريبوز. خلفية تُعدّ عملية إضافة مجموعة ADP-ribosylation تعديلًا ما بعد الترجمة، وقد وُصفت بأنها تحدث على السلسلة الجانبية للعديد من الأحماض الأمينية المستقبلة (اللايسين، والأرجينين، والغلوتامات، والأسبارتات، والسيستين، والسيرين) وعلى النهايات الأمينية للبروتينات، بالإضافة إلى الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي الناقل tRNA (1). تحفز إنزيمات نقل ADP-ribosylation (ADPRTs) نقل ADP-ribose من β-NAD، وتُحرر النيكوتيناميد في هذه العملية. تُشكل إنزيمات نقل ADP-ribosylation أحادية (MARTs، أو monoPARPs) الغالبية العظمى من إنزيمات ADP-ribosylation. تنقل هذه الإنزيمات الأحادية، التي تشمل السيرتوينات والعديد من بروتينات PARP (ARTD) وART، وحدة ADP-ribose واحدة إلى الحمض الأميني المستهدف (MARylation). تُعدّ بوليميرازات عديد الأدينوزين ثنائي الفوسفات الريبوزي (polyPARPs)، أو الإنزيمات المتعددة، والتي تشمل PARP1 و2 و5a و5b البشرية، الأكثر دراسةً، وهي قادرة على بلمرة سلاسل خطية أو متفرعة تصل إلى 200 وحدة من عديد الأدينوزين ثنائي الفوسفات الريبوزي (ADPR) (2). وتُحدد الخصوصية بشكل أساسي، ولكن ليس حصريًا، بواسطة نمط ثلاثي تحفيزي غير متتالي، مع بعض الاستثناءات. فالإنزيمات التي تحتوي على نمط RSE، مثل ذيفان الكوليرا، هي ناقلات موجهة للأرجينين، بينما تميل تلك التي تحتوي على ثلاثي HYE إلى إظهار نشاط بوليميراز (3، 4). وتُعدّ عملية إضافة عديد الأدينوزين ثنائي الفوسفات الريبوزي عملية عكسية، ويمكن تحللها إلى وحدة واحدة من عديد الأدينوزين ثنائي الفوسفات الريبوزي بواسطة بولي-أدينوزين ثنائي الفوسفات الريبوزي جليكوهيدرولاز (PARG) أو عديد الأدينوزين ثنائي الفوسفات الريبوزي هيدرولاز 3 (ARH3)، أو إزالتها تمامًا من البقايا المستهدفة بواسطة ARH1 أو TARG1 أو MacroD1 أو MacroD2 (5). تُشارك عملية إضافة ريبوز الأدينوزين ثنائي الفوسفات (ADP-ribose) في العديد من العمليات الخلوية، بما في ذلك تكوين المغزل الانقسامي، وفك تكثيف الكروماتين، والاستجابة للإجهاد الخلوي، وكبت الفيروسات القهقرية، وبيولوجيا الحمض النووي الريبي (RNA)، والنسخ. ولكن الوظيفة الأكثر شهرة لسلاسل ADP-ribose هي العمل كدعامة لاستقطاب بروتينات إصلاح الحمض النووي التي تحتوي على وحدات ربط PAR إلى مواقع تلف الحمض النووي (6). يحتوي كل من بروتين XRCC1 (بروتين إصلاح الحمض النووي المكمل المتقاطع 1)، والهيستون macroH2A1، وRNF146 (Iduna)، وهو إنزيم E3 ubiquitin ligase، والعديد من بروتينات PARP نفسها، من بين أمور أخرى، على وحدات ربط PAR (PBMs) أو نطاقات مثل: WWE، أو نطاق إصبع الزنك الرابط لـ PAR (PBZ)، أو النطاقات الكبيرة (7). تلعب عملية إضافة ريبوز الأدينوزين ثنائي الفوسفات دورًا محوريًا في بقاء الخلية، وتخضع لتنظيم دقيق. قد يؤدي نقص إنزيم PARP إلى جعل الخلية عرضةً للاستماتة الخلوية الناتجة عن تلف الحمض النووي، بينما قد يؤدي فرط إضافة مجموعة ADP-ribose إلى موت الخلايا المبرمج (parthanatos)، وهو شكل فريد من أشكال موت الخلايا (8). وقد أثار دور إضافة مجموعة ADP-ribose في إصلاح الحمض النووي اهتمامًا كبيرًا بتطوير مثبطات دوائية محتملة لإنزيم PARP، ولا سيما لعلاج سرطانات الثدي والبروستاتا وسرطان الرئة ذي الخلايا الصغيرة المصحوبة بطفرات في جينات إصلاح الحمض النووي مثل BRCA1/2 وCHK2 وATM. يُعد كل من Stat1 وPERK وp53 وG-actin وRas أمثلةً قليلةً على البروتينات التي تتأثر وظائفها بإضافة مجموعة ADP-ribose (6، 7). يمكن أن يؤدي تعديل البروتينات بواسطة ADP-ribose إلى منع تفاعلات البروتينات، أو في حالة P2X7، إلى تغيير في بنيتها، مما يزيد من حساسية الخلايا التائية الفأرية الساذجة لـ NAD خارج الخلية في وجود تعبير ART2، وبالتالي يؤدي إلى الاستماتة الخلوية (9). مواصفة التفاعل: الكل الحساسية: داخلية المنشأ المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب