CST، 74178T، 5-فورميل سيتوزين (5-fC) (D5D4K) جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب

جسم مضاد أحادي النسيلة للدراسة. مُعتمد للاستخدام في التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية) واختبار لطخة الحمض النووي. متوفر بحجمين. جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب عالي التخصص ومُعتمد بدقة داخلية، 5-فورميل سيتوزين (5-fC) (D5D4K) (CST #74178) جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية): 1:200 اختبار الحمض النووي النقطي: 1:1000 تخزين يُزوَّد هذا المنتج في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية)، لطخة الحمض النووي النقطية النوعية / الحساسية يكشف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب 5-فورميل سيتوزين (5-fC) (D5D4K) عن 5-fC بتقنية التألق المناعي في الخلايا التي تُفرط في التعبير عن النطاق التحفيزي لـ TET1، وبتقنية التلطيخ النقطي باستخدام قطع PCR ثنائية السلاسل تحتوي على 5-fC. تحتوي العديد من الخلايا والأنسجة على مستويات داخلية منخفضة جدًا من 5-fC قد تقل عن حدود الكشف لهذا الجسم المضاد. وقد تم التحقق من خصوصية هذا الجسم المضاد باستخدام مقايسة الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) والتلطيخ النقطي، ويُظهر خصوصية عالية لـ 5-fC. التفاعل مع الأنواع: من المتوقع أن يتفاعل مع جميع الأنواع المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بـ 5-فورميل-2'-ديوكسي سيتوزين. خلفية يُعدّ مثيلة الحمض النووي عند بقايا السيتوزين تعديلًا وراثيًا فوق جينيًا بالغ الأهمية لتنظيم التعبير الجيني، والبصمة الجينية، ونمو الثدييات (1، 2). يُعتبر 5-ميثيل سيتوزين علامة فوق جينية مثبطة، يُنشئها إنزيمان هما DNMT3a وDNMT3b، ويُحافظ عليها بواسطة DNMT1 (3، 4). كان يُعتقد سابقًا أن 5-ميثيل سيتوزين يُستنفد تلقائيًا أثناء تضاعف الحمض النووي. مع ذلك، أظهرت دراسات لاحقة أن بروتينات نقل عشرة-أحد عشر (TET)، وهي TET1 وTET2 وTET3، قادرة على تحفيز أكسدة السيتوزين المُمَثْيَل إلى 5-هيدروكسي ميثيل سيتوزين (5-hmC) (5). بالإضافة إلى ذلك، تستطيع بروتينات TET أكسدة 5-hmC لتكوين 5-فورميل سيتوزين (5-fC) و5-كربوكسي سيتوزين (5-caC)، وكلاهما يُستأصل بواسطة إنزيم ثايمين-دي إن إيه جليكوزيلاز (TDG)، مما يربط أكسدة السيتوزين بمسار إصلاح استئصال القاعدة ويدعم إزالة مثيلة السيتوزين النشطة (6، 7). وقد تم إثبات هيدروكسي ميثيل السيتوزين بوساطة بروتينات TET لأول مرة في دماغ الفئران والخلايا الجذعية الجنينية (5، 8). ومنذ ذلك الحين، تم اكتشاف هذا التعديل في العديد من الأنسجة، مع أعلى مستوياته في الدماغ (9). في حين يبدو أن 5-fC و5-caC نوعان وسيطان قصيرا العمر، إلا أن هناك أدلة متزايدة تُظهر أن 5-hmC علامة فوق جينية مميزة ذات وظائف فريدة متعددة (10، 11). القاعدة المعدلة نفسها مستقرة وتتفاعل مع العديد من البروتينات القارئة، بما في ذلك MeCP2 (11، 12). يرتفع المستوى العالمي لـ 5-hmC خلال نمو الدماغ، ويتواجد بكثرة في مناطق المحفزات والمعززات المُهيأة. علاوة على ذلك، توجد علاقة عكسية بين مستويات 5-hmC ومثيلة الهيستون H3K9 وH3K27 الثلاثية، مما يشير إلى دور 5-hmC في تنشيط الجينات (12). وقد سُجلت مستويات أقل من 5-hmC في أنواع مختلفة من السرطانات، بما في ذلك سرطان الدم النخاعي وسرطان الجلد (13، 14). مواصفة التفاعل: الكل الحساسية: للخلايا المنقولة فقط المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب