CST، 79561S، القطع والعلامة pAG-Tn5 (محملة)

إنزيم للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج يرجى الرجوع إلى مجموعة أدوات فحص CUT&Tag رقم 77552 للاطلاع على تفاصيل استخدام هذا الإنزيم في فحص CUT&Tag. بعد نفاذية الخلايا وربط الأجسام المضادة الأولية والثانوية، تُعلق الخلايا في 50 ميكرولتر من محلول ديجيتونين عالي الملوحة يحتوي على 2 ميكرولتر من إنزيم pAG-Tn5 (مخفف بنسبة 1:25). تُحضن عينات الخلايا في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة، ثم تُغسل الخلايا بمحلول ديجيتونين عالي الملوحة، وبعد ذلك تُجرى عملية تجزئة الكروماتين. تخزين مُزوَّد في محلول يحتوي على 22 ملي مولار من هيبس بدرجة حموضة 7.4، و44 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و44 ميكرومولار من إيدتا، و0.4 ملي مولار من داي ثيو ثريتول، و0.04% من تريتون X-100، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية، ولا يُقسَّم إلى أجزاء. هذا المنتج صالح للاستخدام لمدة 6 أشهر. النوعية / الحساسية التفاعل مع الأنواع: من المتوقع أن يتفاعل مع جميع الأنواع خلفية على غرار تقنية القطع تحت الأهداف والإطلاق باستخدام النيوكلياز (CUT&RUN)، تُعدّ تقنية القطع تحت الأهداف والتجزئة (CUT&Tag) تقنية فعّالة تُستخدم لدراسة تفاعلات البروتين مع الحمض النووي ضمن سياق الكروماتين الطبيعي للخلية (1-3). تتميز تقنية CUT&Tag بالعديد من مزايا تقنية CUT&RUN، إذ تُوفّر بروتوكولًا سريعًا ودقيقًا وفعّالًا للكشف عن تفاعلات البروتين مع الحمض النووي في الخلية، حتى مع عدد قليل من الخلايا. إضافةً إلى ذلك، تتضمن تقنية CUT&Tag خطوة ربط الحمض النووي المُهايئ بواسطة إنزيم pAG-Tn5، حيث يتم ربط الحمض النووي المُهايئ مباشرةً بشظايا الحمض النووي للكروماتين المُستهدفة بالأجسام المضادة داخل الخلية. ونتيجةً لذلك، يُصبح تحضير مكتبة الحمض النووي اللاحقة أسرع وأسهل بكثير من تحضيرها بعد تقنية CUT&RUN، إذ تخلو من إصلاح نهايات الحمض النووي، وإضافة ذيل الأدينين، وربط الحمض النووي المُهايئ. يعمل برنامج CUT&Tag بشكل جيد للغاية في تحليل تعديلات الهيستون، بالإضافة إلى رسم خرائط لبعض عوامل النسخ وعوامل الربط المساعدة. أسماء بديلة C&T؛ CnT؛ CUT & Tag؛ قص ووسم؛ قص ووسم؛ CUT&Tag؛ قص ووسم؛ تعديل الهيستون