CST, 8240S, Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة يوبيكويتينات H2A.4 (Lys119). مُعتمد للاستخدام في تقنيات WB، وIP، وIF، وF، وChIP، وC&R، وC&T. متوفر بحجمين. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب (D27C4) المُستخلص من يوبيكويتين-هيستون H2A (Lys119) (CST #8240) بدقة عالية وخضع لاختبارات داخلية صارمة، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج للحصول على أفضل نتائج في تقنيتي ChIP وChIP-seq، استخدم 5 ميكرولتر من الجسم المضاد و10 ميكروغرام من الكروماتين (ما يعادل تقريبًا 4 × 10⁶ خلية) لكل عملية ترسيب مناعي. تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد باستخدام مجموعات SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP. تم تحديد تخفيف CUT&RUN باستخدام مجموعة CUT&RUN Assay Kit رقم 86652. تم تحديد تخفيف CUT&Tag باستخدام مجموعة CUT&Tag Assay Kit رقم 77552. اللطخة الغربية: 1:2000 الترسيب المناعي: 1:100 التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية): 1:800 - 1:1600 قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ): 1:800 - 1:3200 كروماتين IP: 1:100 تسلسل الحمض النووي للكروماتين: 1:100 قطع وهروب: 1:50 قص ولصق: 1:50 تخزين يُباع في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. للحصول على نسخة خالية من الحامل (خالية من ألبومين المصل البقري والأزيد)، يُرجى مراجعة المنتج رقم 45772. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، الترسيب المناعي، التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية)، قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ)، ترسيب الكروماتين المناعي، تسلسل ترسيب الكروماتين المناعي، CUT&RUN، CUT&Tag النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب Ubiquityl-Histone H2A (Lys119) (D27C4) على المستويات الداخلية لبروتين الهيستون H2A فقط عندما يكون مُيوبيكويتينيًا عند Lys119. لا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع البروتينات المُيوبيكويتينية الأخرى أو اليوبيكويتين الحر. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع البقايا القريبة من الطرف الكربوكسيلي لبروتين الهيستون H2A البشري الذي يتم فيه إضافة جزيء يوبيكويتين واحد إلى Lys119. خلفية النيوكليوسوم، المكون من أربعة بروتينات هيستون أساسية (H2A، H2B، H3، وH4)، هو الوحدة البنائية الرئيسية للكروماتين. كان يُعتقد في الأصل أن الهيستونات تعمل كدعامة ثابتة لتعبئة الحمض النووي، ولكن تبين الآن أنها بروتينات ديناميكية تخضع لأنواع متعددة من التعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الأسيتلة والفسفرة والمثيلة واليوبيكويتين (1). اليوبيكويتين هو وحدة ببتيدية محفوظة مكونة من 76 حمضًا أمينيًا، ويمكن ربطها تساهميًا بالعديد من البروتينات الخلوية من خلال عملية اليوبيكويتين. تشارك ثلاثة مكونات في عملية اقتران البروتين باليوبيكويتين هذه. يتم تنشيط اليوبيكويتين أولاً عن طريق تكوين مركب ثيوإستر مع مكون التنشيط E1؛ يُنقل اليوبيكويتين المُنشَّط لاحقًا إلى البروتين الناقل لليوبيكويتين E2، ثم من E2 إلى إنزيم اليوبيكويتين ليغاز E3 لتوصيله النهائي إلى مجموعة ε-NH لبقايا الليسين في البروتين المستهدف (2). يُضاف جزيء يوبيكويتين واحد إلى الهيستون H2A عند الليسين 119 بواسطة مُركَّب بولي كومب الكابت 1 (PRC1)، وهو ضروري لكبت التعبير الجيني للجينات التطورية وتعطيل الكروموسوم X (3-6). يتكون PRC1 من Bmi1 وRING1A (أو RING1 أو RNF1)، وكلاهما يعمل على تعزيز نشاط إنزيم اليوبيكويتين ليغاز E3 للوحدة الفرعية المحفزة RING1B (أو RING2 أو RNF2) (3،4). كما يُضاف جزيء يوبيكويتين واحد إلى الهيستون H2A عند الليسين 119 في مواقع تلف الحمض النووي. يتطلب حدث اليوبيكويتين الأحادي هذا مكونات PRC1 Bmi1 و RING1B، بالإضافة إلى إنزيم اليوبيكويتين ليغاز E3 آخر RNF8، ويساهم في التوظيف اللاحق لمركب BRCA1، عن طريق ربط RAP80/UIMC1 (بروتين يحتوي على وحدة تفاعلية لليوبيكويتين) (7-10). أسماء بديلة bA317E16.2؛ الهيستون 1 المتجمع H2A؛ عائلة الهيستون H2A، العضو R؛ الهيستون 1 المتجمع H2A؛ H2A.4؛ H2A1A؛ H2AA؛ H2AC1؛ H2AFR؛ HIST1H2AA؛ الهيستون 1، H2aa؛ مجموعة الهيستون 1، العضو a من عائلة H2A؛ مجموعة الهيستون 1، H2aa؛ الهيستون H2A من النوع 1-A؛ الهيستون H2A/r؛ TH2A مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 23 المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب