CST، 84748S، بروتياز PTMScan® LysC

إنزيم للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج بالنسبة لبروتوكولات PTMScan®، نوصي بتحضير محلول أساسي بتركيز 5 ملغم/مل عن طريق إذابة 1 ملغم في 0.2 مل من محلول HEPES بتركيز 20 ملي مولار ودرجة حموضة 8.0. قسّم الإنزيم المُذاب إلى حصص صغيرة للاستخدام لمرة واحدة. خزّن الحصص عند درجة حرارة -80 درجة مئوية. راجع بروتوكول PTMScan® لمزيد من التفاصيل. تخزين يتمتع إنزيم LysC المجفف بالتجميد بفترة صلاحية تصل إلى 12 شهرًا عند تخزينه في درجة حرارة -20 درجة مئوية. وبمجرد إعادة تكوينه، يمكن تقسيم الإنزيم إلى حصص صغيرة وتخزينه في درجة حرارة -80 درجة مئوية لمدة 6 أشهر. النوعية / الحساسية نشاط LysC أكبر من أو يساوي 1 وحدة نشاط/ملغ. المصدر / التنقية تم إنتاج بروتياز PTMScan LysC بتقنية إعادة التركيب، ثم نُقّيَ ووُفّر مُجفّفًا بالتجميد في محلول يحتوي على 1-5% من Tris و20-40% من مانيتول. وتم التحقق من نقاوته باستخدام تقنية SDS-PAGE. تُنتج وحدة أميداز واحدة من الإنزيم 1 ميكرومول من بارا-نيتروأنيلين في الدقيقة عند درجة حموضة 9.5 ودرجة حرارة 30 درجة مئوية. خلفية يقوم إنزيم LysC بفصل البروتينات من جهة الكربوكسيل لبقايا الليسين، مما يجعله أداةً مفيدةً في تسلسل البروتينات وتطبيقات علم البروتينات. تم تنقية هذا الإنزيم في الأصل من بكتيريا التربة سالبة الغرام (1). وقد وُجد أنه يعمل بكفاءة مثلى عند درجات حرارة تتراوح بين 30 و37 درجة مئوية، ودرجة حموضة تتراوح بين 9.0 و9.5، ولكنه يتحلل عند 50 درجة مئوية وما فوق. يُحافظ على نشاطه في محاليل اليوريا بتركيز 4 مولار أو محاليل كبريتات دوديسيل الصوديوم بتركيز 0.1% لمدة تصل إلى 6 ساعات عند 30 درجة مئوية. تشمل مثبطات هذا الإنزيم PMSF وDFP وTLCK.