CST، 8496S، جسم مضاد للفوسفو-فوسفولامبان (Ser16/Thr17)

جسم مضاد متعدد النسائل لدراسة فوسفات PLB (Ser16/Thr17). مُعتمد للاستخدام في تقنية Western Blotting. يتميز هذا الجسم المضاد (CST #8496) بدرجة عالية من التخصص، وقد خضع لاختبارات داخلية دقيقة، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج اللطخة الغربية: 1:1000 تخزين يُزوَّد المنتج في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد للفوسفولامبان (Ser16/Thr17) على المستويات الداخلية لبروتين الفوسفولامبان فقط عندما يكون مُفسفرًا عند Ser16 وThr17. ولا يكشف هذا الجسم المضاد عن الفوسفولامبان أحادي الفسفرة أو غير المُفسفر. التفاعل مع الأنواع: الجرذ المصدر / التنقية تُنتَج الأجسام المضادة متعددة النسائل عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد فسفوري اصطناعي يُطابق الأحماض الأمينية المحيطة بالحمضين الأمينيين سيرين 16 وثريونين 17 في بروتين الفوسفولامبان البشري. وتُنقّى الأجسام المضادة باستخدام كروماتوغرافيا تقارب البروتين A والببتيد. خلفية تم تحديد الفوسفولامبان (PLN) كمكون بروتيني فسفوري رئيسي في الشبكة الساركوبلازمية (SR) (1). ويُشتق اسمه "لامبان" من الكلمة اليونانية "لامبانو" التي تعني "الاستقبال"، وذلك لأن الفوسفولامبان يُفسفر بكثافة على بقايا السيرين والثريونين استجابةً لتحفيز القلب (1). وعلى الرغم من الاعتقاد السائد سابقًا بأنه بروتين واحد بوزن 20-25 كيلو دالتون نظرًا لحركته الكهربائية على هلام SDS-PAGE، إلا أن الفوسفولامبان في الواقع بروتين غشائي يتكون من 52 حمضًا أمينيًا، بوزن 6 كيلو دالتون، وقادر على تكوين متجانسات مستقرة، حتى في وجود SDS (2). وبالرغم من التعبير العالي جدًا عنه في أنسجة القلب، يُعبر عن الفوسفولامبان أيضًا في العضلات الهيكلية والملساء (3). ويقتصر وجود الفوسفولامبان على الشبكة الساركوبلازمية، حيث يعمل كمنظم لإنزيم ATPase الكالسيوم في الشبكة الساركوبلازمية-الإندوبلازمية، SERCA (4). يرتبط بروتين PLN مباشرةً بإنزيم SERCA، مما يقلل بشكل فعال من انجذابه للكالسيوم، وبالتالي يقلل من نقل الكالسيوم إلى الشبكة الساركوبلازمية. يؤدي فسفرة بروتين PLN عند الموقع Ser16 بواسطة بروتين كيناز A أو بروتين كيناز ضمور العضلات التوتري، و/أو فسفرته عند الموقع Thr17 بواسطة بروتين كيناز المعتمد على الكالسيوم/الكالمودولين، إلى تحرير بروتين PLN من إنزيم SERCA، وإزالة هذا التثبيط، وزيادة امتصاص الكالسيوم بواسطة الشبكة الساركوبلازمية (راجع المراجع 5 و6). لطالما ساد الاعتقاد بأن الفسفرة عند الموقعين Ser16 وThr17 تحدث بالتتابع، ولكن تشير أدلة متزايدة إلى أن الفسفرة، وخاصة عند الموقع Thr17، قد تخضع لتنظيم تفاضلي (راجع المراجع 7 و8). وقد أظهرت نماذج القوارض المصابة بفشل القلب أن مستوى التعبير عن بروتين PLN ودرجة فسفرته عاملان حاسمان في تعديل تدفق الكالسيوم وقوة انقباض عضلة القلب (راجع المراجع 9-11). يؤدي حذف أو انخفاض التعبير عن جين PLN إلى زيادة تدفق الكالسيوم وزيادة قوة انقباض عضلة القلب، بينما يؤدي فرط التعبير عن PLN إلى عزل SERCA، وانخفاض تدفق الكالسيوم، وضعف الانقباض، واستعادة وظائف القلب وفشله في نماذج الفئران المصابة بارتفاع ضغط الدم واعتلال عضلة القلب (راجع المرجع 10). وقد تم الكشف عن طفرات مختلفة في جين PLN لدى البشر، مما يؤدي إما إلى انخفاض أو انعدام التعبير عن بروتين PLN (12، 13) أو إلى عيوب في الارتباط بين PLN وSERCA و/أو البروتينات التنظيمية (14، 15)، وكلاهما يؤدي إلى اعتلال عضلة القلب وفشل القلب. ومن المثير للاهتمام، أنه في حين أن النمط الظاهري البشري لمعظم عيوب PLN يحاكي النمط الظاهري الذي يُلاحظ في القوارض والعكس صحيح، إلا أن هناك بعض الحالات التي يختلف فيها نوع وشدة أمراض القلب الناتجة عن طفرات PLN بين القوارض والبشر، مما يجعل التوصل إلى آلية متفق عليها أمرًا صعبًا. أسماء بديلة فوسفولامبان القلبي؛ CMD1P؛ CMH18؛ فوسفولامبان؛ PLB؛ PLN؛ PPLA مواصفة التفاعل: R الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 6 (مونومر)؛ 12، 24 (أوليغومرات) المصدر: أرنب