مجموعة الكشف النشط عن رو، CST، 8820S

مجموعة أدوات فحص لدراسة RhoA في مجال البحث. تخزين GTPγS: يُحفظ في درجة حرارة -80 درجة مئوية. GDP: يُحفظ في درجة حرارة -80 درجة مئوية. GST-Rhotekin-RBD: يُحفظ في درجة حرارة -80 درجة مئوية. محلول التحلل/الربط/الغسل: يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية. راتنج الجلوتاثيون: يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية. محلول عينة SDS: يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية. كوب الدوران وأنابيب التجميع: تُحفظ في درجة حرارة الغرفة. جسم مضاد أرنب Rho: يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: وظيفية النوعية / الحساسية تكشف مجموعة الكشف عن Rho النشط عن المستويات الداخلية لـ Rho المرتبط بـ GTP (النشط) كما هو موضح في الشكل 1. تكشف هذه المجموعة عن البروتينات من الأنواع المشار إليها، كما تم تحديده من خلال الاختبارات الداخلية، ولكنها قد تكشف أيضًا عن البروتينات المتماثلة من أنواع أخرى. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر خلفية تضم عائلة Ras الفائقة من البروتينات الصغيرة الرابطة لـ GTP (بروتينات G) فئة كبيرة من البروتينات (أكثر من 150 عضوًا) يمكن تصنيفها إلى خمس عائلات على الأقل بناءً على تسلسلها وتشابه وظائفها: Ras وRho وRab وArf وRan (1-3). تتميز هذه البروتينات الصغيرة G بنشاط ربط GDP/GTP ونشاط GTPase، وتعمل كمفاتيح ثنائية في أحداث خلوية وتطورية متنوعة تشمل تقدم دورة الخلية، وبقاء الخلية، وتنظيم الهيكل الخلوي للأكتين، واستقطاب الخلية وحركتها، والنقل الحويصلي والنووي (1). تحفز إشارة أولية انفصال GDP عن شكله المرتبط بـ GDP (غير النشط)، مما يؤدي إلى ارتباط GTP وتكوين الشكل المرتبط بـ GTP (النشط). بعد ذلك، يخضع بروتين G النشط لتغير بنيوي في منطقة ربط المؤثرات النهائية، مما يؤدي إلى ربط المؤثرات النهائية وتنظيمها. يمكن إيقاف هذا التنشيط بواسطة نشاط GTPase الذاتي، الذي يُحلل GTP إلى GDP ويُحرر المؤثرات النهائية. كما تُنظم عوامل تبادل النيوكليوتيدات الغوانينية (GEFs) وبروتينات عائلة Ras الفائقة، وهما نشاطان ذاتيان لتبادل النيوكليوتيدات الغوانينية وتحليل GTP، بواسطة بروتينات مُنشطة لـ GTPase (GAPs) تُعيد GTPase إلى شكله غير النشط المرتبط بـ GDP (4). تعمل بروتينات GTPase الصغيرة من عائلة Rho، بما في ذلك Rho وRac وcdc42، كمفاتيح جزيئية، تُنظم عمليات مثل هجرة الخلايا، والالتصاق، والتكاثر، والتمايز. يتم تنشيطها بواسطة عوامل تبادل النيوكليوتيدات الغوانينية (GEFs)، التي تُحفز تبادل GDP المرتبط بـ GTP، وتُثبط بواسطة بروتينات مُنشطة لـ GTPase (GAPs)، التي تُحفز تحليل GTP إلى GDP. يُوفّر الارتباط المتكافئ لمثبط تفكك Rho GDP (RhoGDI) مستوىً ثالثًا من التنظيم (5). تتشابه بروتينات RhoA وRhoB وRhoC تشابهًا كبيرًا، ولكن يبدو أن لها وظائف بيولوجية متباينة. تسمح التعديلات الطرفية الكربوكسيلية والاختلافات في التموضع الخلوي لهذه البروتينات الثلاثة بالاستجابة لجزيئات الإشارة المختلفة والتأثير عليها (6، 7). أسماء بديلة 11521؛ 11522؛ 11523؛ 11524؛ 11525؛ 11526؛ 11856؛ 11860؛ 8789؛ GTPase