CST، 8883S، SignalSilence® Aurora A/AIK siRNA I

استخدام الحمض النووي الريبوزي المتداخل الصغير (siRNA) لدراسة أورورا أ في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج توصي شركة CST بإجراء عملية نقل الجينات باستخدام 100 نانومتر من SignalSilence® Aurora A/AIK siRNA I قبل 48 إلى 72 ساعة من تحلل الخلايا. لإجراء عملية نقل الجينات، اتبع البروتوكول المقدم من الشركة المصنعة لكاشف نقل الجينات. لا تتردد في الاتصال بشركة CST لأي استفسارات حول الاستخدام. تحتوي كل قارورة على ما يعادل 100 عملية نقل جينات، وهو ما يتوافق مع تركيز نهائي لـ siRNA يبلغ 100 نانومتر لكل عملية نقل جينات في صفيحة ذات 24 بئراً بحجم إجمالي 300 ميكرولتر لكل بئر. تخزين يُزوَّد منتج SignalSilence® siRNA في ماء خالٍ من إنزيم RNase. قسّم المنتج إلى حصص صغيرة وخزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية. خلفية تنتمي كينازات أورورا إلى عائلة محفوظة للغاية من كينازات السيرين/ثريونين الانقسامية، وقد تم تحديد ثلاثة أعضاء منها لدى الثدييات: أورورا A وB وC (1،2). تشير الدراسات التي تناولت نمط التعبير الزمني والتوطين الخلوي لكينازات أورورا في الخلايا الانقسامية إلى ارتباطها ببنية الانقسام. تمتد التأثيرات الوظيفية لكينازات أورورا من طور G2 إلى انقسام السيتوبلازم، وقد تشارك في أحداث رئيسية في دورة الخلية، مثل تضاعف الجسيم المركزي، وتوجيه الكروموسومات وانفصالها، وتحديد موضع أخدود الانقسام، والانغراس (3). يُرصد بروتين أورورا A في الجسيمات المركزية، وعلى طول الأنيبيبات الدقيقة للمغزل الانقسامي، وفي سيتوبلازم الخلايا المتكاثرة انقساميًا. تكون مستويات بروتين أورورا A منخفضة خلال طوري G1 وS، وتصل إلى ذروتها خلال طور G2/M من دورة الخلية. تؤدي فسفرة بروتين أورورا A عند الثريونين 288 في نطاقه التحفيزي إلى زيادة نشاط الكيناز. يشارك بروتين أورورا A في فصل الجسيم المركزي ونضجه، وتكوين المغزل واستقراره. كما يبلغ التعبير عن بروتين أورورا B ذروته خلال طور G2/M من دورة الخلية؛ ويبلغ نشاط كيناز أورورا B ذروته عند الانتقال من الطور الاستوائي إلى نهاية الانقسام المتساوي. يرتبط بروتين أورورا B بالكروموسومات خلال الطور التمهيدي قبل أن ينتقل إلى المغزل في الطور الانفصالي. ينظم بروتين أورورا B انفصال الكروموسومات من خلال التحكم في ارتباط الأنيبيبات الدقيقة بالحيوز الحركي وانقسام السيتوبلازم. يرتبط التعبير عن كل من بروتين أورورا A وبروتين أورورا B خلال الانتقال من طور G2/M ارتباطًا وثيقًا بفسفرة الهيستون H3 (4، 5)؛ وقد لاحظ الباحثون فرط التعبير عن هذه الكينازات في أنواع مختلفة من السرطانات البشرية (2، 4). يتمركز بروتين أورورا سي في الجسيم المركزي من الطور الانفصالي إلى انقسام السيتوبلازم، ويبلغ كل من مستوى الحمض النووي الريبوزي المرسال (mRNA) والبروتين ذروتهما خلال طور G2/M. على الرغم من أن التعبير النموذجي عن بروتين أورورا سي يقتصر على الخصية، إلا أن الدراسات البحثية تشير إلى رصد فرط التعبير عنه في العديد من سلالات الخلايا السرطانية (6). مواصفة التفاعل: H