CST، 8940S، أليكسا فلور® 647 فالويدين

أصباغ خلوية للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج لتحضير محلول مركز 100X، أعد إذابة المادة المجففة بالتجميد في 200 ميكرولتر من ثنائي ميثيل سلفوكسيد لا مائي. ثبّت الخلايا لمدة 15 دقيقة باستخدام محلول فورمالدهيد 4% طازج وخالٍ من الميثانول، ثم اشطفها ثلاث مرات بمحلول فوسفات ملحي (PBS) لمدة 5 دقائق لكل مرة. بعد التثبيت، اتبع بروتوكول CST للتلوين المناعي. بعد حضانة الأجسام المضادة الأولية والثانوية، يمكن تخفيف ألكسا فلور® 647 فالويدين بنسبة 1:100 (1 ميكرولتر لكل 100 ميكرولتر من حجم العينة) في محلول فوسفات ملحي (PBS) وإضافته إلى الخلايا. اتركها لتتحضين لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة، ثم اشطفها مرة واحدة بمحلول فوسفات ملحي (PBS). غطِّ الشرائح الزجاجية بمحلول برولونج جولد المضاد للتلاشي وافحص العينة باستخدام الطول الموجي المناسب للإثارة. ملاحظة: تم تغيير معلومات استخدام هذا المنتج اعتبارًا من 1 سبتمبر 2024. كانت التوصيات السابقة هي استخدام الميثانول أو ثنائي ميثيل سلفوكسيد كمذيب للتجفيف بالتجميد للمادة؛ أما الآن فيوصى باستخدام ثنائي ميثيل سلفوكسيد فقط. تخزين تُقدَّم هذه المادة على شكل مسحوق مُجفَّف بالتجميد، وهو مستقر لمدة عام واحد عند درجة حرارة -20 درجة مئوية، بشرط تجفيفه وحمايته من الضوء. يجب إذابة مُقترنات الفاللويدين في ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO) لا مائي لتحضير محاليل مركزة، يُرجى الرجوع إلى تعليمات الاستخدام لمزيد من التفاصيل. بعد إذابتها في DMSO، تصبح المحاليل المركزة مستقرة لمدة عام واحد عند درجة حرارة -20 درجة مئوية. يكون استقرارها في المحاليل المائية منخفضًا، ويجب أن تبقى المُقترنة في وجود محلول مائي فقط أثناء حضانتها مع الخلايا. خلفية الأكتين، وهو بروتين حقيقي النواة واسع الانتشار، يُعدّ المكوّن الرئيسي للهيكل الخلوي. يُعرف ستة أشكال متماثلة على الأقل منه في الثدييات. يُعبّر عن الأكتين غير العضلي بيتا وجاما، المعروف أيضًا بالأكتين السيتوبلازمي، بشكل أساسي في الخلايا غير العضلية، حيث يتحكمان في بنية الخلية وحركتها (1). يوجد الأكتين بشكل رئيسي على هيئة بوليمر ليفي، يُسمى F-أكتين. استجابةً لإشارات إعادة تنظيم الهيكل الخلوي أثناء عمليات مثل انقسام السيتوبلازم، والبلعمة الخلوية، أو الإجهاد، يُحفّز الكوفيلين تفتت وتفكك F-أكتين، مما يؤدي إلى زيادة في الشكل الكروي الأحادي، G-أكتين (2). الفالويدين هو ببتيد ثنائي الحلقة سام موجود بشكل طبيعي في فطر أمانيتا فالويدس، الذي يرتبط بسرعة وقوة بـ F-أكتين (3). أسماء بديلة أليكسا فلور؛ أليكسا فلور 647 فالويدين؛ فالويدين