مجموعة CST، 91336S، PTMScan® Phospho-Thr-X-Arg Motif [pT(P/X)R]

برنامج PTMScan للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج تُحلل الخلايا في محلول منظم يحتوي على اليوريا، وتُهضم البروتينات الخلوية بواسطة إنزيمات البروتياز، ثم تُنقى الببتيدات الناتجة باستخدام استخلاص الطور الصلب ذي الطور المعكوس. بعد ذلك، تُخضع الببتيدات لتنقية المناعة باستخدام جسم مضاد PTMScan® Motif مرتبط بخرزات بروتين A أجاروز. تُزال الببتيدات غير المرتبطة بالغسل، وتُستخلص الببتيدات الحاملة لتعديلات ما بعد الترجمة (PTM) باستخدام حمض مخفف. تُجرى عملية تنقية الطور المعكوس على رؤوس دقيقة لإزالة الأملاح وفصل الببتيدات عن الجسم المضاد قبل تركيز الببتيدات المُثرية لتحليلها بتقنية LC-MS/MS. توصي شركة CST باستخدام محلول PTMScan® IAP رقم 9993 المرفق مع المجموعة. تخزين تُزوَّد حبيبات الأجسام المضادة في محلول منظم IAP يحتوي على 50% جلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: PTMScan خلفية تؤدي عائلتا كينازات البروتين سيرين/ثريونين MAPK وCDK أدوارًا مهمة في تكاثر الخلايا وتنظيم دورة الخلية. تقوم هذه الكينازات بفسفرة بقايا الثريونين أو السيرين التي تليها بقايا البرولين (1-3). تقوم MAPK بفسفرة الركائز ذات التسلسل المتفق عليه PX(S/T)P، بينما تقوم CDK بفسفرة الركائز التي تحتوي على التسلسل المتفق عليه (S/T)PXR/K (4، 5). يمكن تنظيم بعض جزيئات الإشارة عن طريق الفسفرة عند ثريونين محدد متبوعًا بالأرجينين أو الليسين في الموضع +2. على سبيل المثال، تقوم نظائر PKC التقليدية بفسفرة الركائز التي تحتوي على سيرين أو ثريونين مع أرجينين أو ليسين في المواضع -3، -2، و+2 (6، 7). طورت شركة Cell Signaling Technology أجسامًا مضادة ترتبط بمواقع الفسفرة التي تحتوي على النمط T(P/X)R لاكتشاف وتحديد خصائص البروتينات على مستوى البروتينوم لركائز الكيناز. أسماء بديلة TPR؛ TXR