مستخلصات الخلايا CST، 9253S، SAPK/JNK للتحكم

مجموعة استخلاص الخلايا لدراسة SAPK/JNK1 في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج يُغلى لمدة 3 دقائق قبل الاستخدام. يُحمّل 15 ميكرولتر من مستخلصات خلايا التحكم SAPK/JNK المفسفرة وغير المفسفرة في كل حارة. تخزين يُقدّم في محلول عازل لعينات SDS: 62.5 ملي مولار من Tris-HCl (الأس الهيدروجيني 6.8 عند 25 درجة مئوية)، 2% وزن/حجم من SDS، 10% جلسرين، 50 ملي مولار من DTT، 0.01% وزن/حجم من الفينول الأحمر أو بروموفينول الأزرق. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية، أو في درجة حرارة -80 درجة مئوية للتخزين طويل الأمد. خلفية يُفعَّل بروتين كيناز/كيناز جون الطرفي الأميني المنشط بالإجهاد (SAPK/JNK) بقوة وبشكل انتقائي بواسطة مجموعة متنوعة من الضغوط البيئية، بما في ذلك الأشعة فوق البنفسجية وأشعة جاما، والسيراميدات، والسيتوكينات الالتهابية، وفي بعض الحالات، عوامل النمو ومحفزات مستقبلات البروتين المقترن بالبروتين ج (GPCR) (1-6). وكما هو الحال مع بروتينات كينازات البروتين المنشطة بالميتوجين الأخرى (MAPKs)، تتكون وحدة الإشارة الأساسية من كيناز كيناز البروتين المنشط بالميتوجين (MAPKKK)، وعادةً ما يكون MEKK1-MEKK4، أو بواسطة أحد كينازات السلالة المختلطة (MLKs)، التي تُفسفر وتُفعِّل MKK4/7. عند التنشيط، تُفسفر كينازات السلالة المختلطة (MKKs) وتُفعِّل كيناز SAPK/JNK (2). تُنقل إشارات الإجهاد إلى هذه السلسلة بواسطة بروتينات GTPases الصغيرة من عائلة Rho (Rac، Rho، cdc42) (3). يتوسط كل من Rac1 وcdc42 في تحفيز كينازات السلالة المختلطة (MEKKs) وكينازات السلالة المختلطة (MLKs) (3). بدلاً من ذلك، يمكن تنشيط MKK4/7 بآلية مستقلة عن GTPase عبر تحفيز أحد أفراد عائلة كيناز المركز الجرثومي (GCK) (4). يوجد ثلاثة جينات SAPK/JNK، يخضع كل منها لعملية التضفير البديل، مما ينتج عنه العديد من الأشكال المتغايرة (3). عندما يكون SAPK/JNK نشطًا كجزيء ثنائي، يمكنه الانتقال إلى النواة وتنظيم النسخ من خلال تأثيره على c-Jun وATF-2 وعوامل نسخ أخرى (3، 5).