CST، 93569S، خرز مغناطيسي كونكانافالين أ ومحلول التنشيط

مجموعة أدوات أساسية للدراسة في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج بالنسبة لاختبارات CUT&RUN وCUT&Tag، نوصي باستخدام 10 ميكرولتر من خرز كونكانافالين أ المغناطيسي لكل تفاعل. قبل الاستخدام، يجب غسل خرز كونكانافالين أ المغناطيسي مرتين باستخدام 10 أضعاف حجمه من محلول تنشيط خرز كونكانافالين أ، ثم إعادة تعليقه في حجم من محلول تنشيط خرز كونكانافالين أ مساوٍ لحجم معلق الخرز الأولي. يجب استخدام الخرز المنشط خلال يوم واحد. تخزين يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية. لا تُجمّد خرزات كونكانافالين أ المغناطيسية! هذا المنتج صالح للاستخدام لمدة 12 شهرًا على الأقل. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: CUT&RUN، CUT&Tag خلفية على غرار اختبار الترسيب المناعي للكروماتين (ChIP)، تُعدّ تقنيتا القطع تحت الأهداف والإطلاق باستخدام النيوكلياز (CUT&RUN) والقطع تحت الأهداف والتجزئة (CUT&Tag) تقنيات فعّالة ومتعددة الاستخدامات لدراسة تفاعلات البروتين مع الحمض النووي ضمن سياق الكروماتين الطبيعي للخلية (1-7). توفر تقنية CUT&RUN اختبارًا سريعًا ودقيقًا وفعّالًا للكشف عن تفاعلات البروتين مع الحمض النووي في الخلية، حتى مع عدد قليل من الخلايا. وعلى عكس اختبار ChIP، فإنّ تقنية CUT&RUN لا تتطلب الربط المتقاطع بالفورمالديهايد، ولا تجزئة الكروماتين، ولا الترسيب المناعي، مما يجعلها طريقة أسرع وأكثر كفاءة لإثراء تفاعلات البروتين مع الحمض النووي وتحديد الجينات المستهدفة. يمكن إجراء اختبار CUT&RUN في أقل من يوم واحد، بدءًا من الخلايا الحية وصولًا إلى الحمض النووي النقي، وقد ثبتت فعاليته مع عدد قليل من الخلايا يتراوح بين 500 و1000 خلية لكل اختبار (1،2). بدلاً من تجزئة الكروماتين الخلوي بالكامل كما هو الحال في تقنية ChIP، تستخدم تقنية CUT&RUN هضم الكروماتين الموجه بالأجسام المضادة، مما ينتج عنه إشارة خلفية أقل بكثير من تلك الموجودة في اختبار ChIP. ونتيجة لذلك، تتطلب تقنية CUT&RUN عُشر عمق التسلسل المطلوب لاختبارات ChIP-seq فقط (1،2). وأخيرًا، يسمح تضمين الحمض النووي المُضاف كعنصر تحكم بسيط بالقياس الكمي الدقيق وتطبيع ارتباط البروتين المستهدف، وهو أمر غير ممكن باستخدام طريقة ChIP. وهذا يوفر تطبيعًا فعالًا للإشارات بين العينات وبين التجارب. تتمتع تقنية CUT&Tag بالعديد من المزايا نفسها التي تتمتع بها تقنية CUT&RUN، حيث توفر بروتوكولًا سريعًا وقويًا وفعالًا للكشف عن تفاعلات البروتين مع الحمض النووي في الخلية، حتى مع عدد قليل من الخلايا. بالإضافة إلى ذلك، تتضمن تقنية CUT&Tag خطوة ربط الحمض النووي المُحَوِّل بواسطة إنزيم pAG-Tn5، حيث يتم ربط الحمض النووي المُحَوِّل مباشرةً بشظايا الحمض النووي للكروماتين المُستهدفة بالأجسام المضادة داخل الخلية. ونتيجةً لذلك، يصبح تحضير مكتبة الحمض النووي اللاحقة أسرع وأسهل بكثير من تحضيرها بعد تقنية CUT&RUN، إذ يخلو من إصلاح نهايات الحمض النووي، وإضافة ذيل الأدينين، وربط المُحَوِّل. وتُعدّ تقنية CUT&Tag فعّالة للغاية في تحليل تعديلات الهيستون، بالإضافة إلى تحديد مواقع ارتباط بعض عوامل النسخ والعوامل المساعدة. أسماء بديلة التنشيط؛ الخرز. سي آند آر؛ كنر. يخدع أ؛ يخدع أ؛ كونا؛ كونا؛ كونكانافالين. قطع وتشغيل؛ قطع وعلامة؛ قطع وتشغيل؛ القطع والعلامة؛ قطع وتشغيل؛ قطع وعلامة؛ قطع وعلامة؛ كاتاندرون. CUTandRUN; CUTandTag; تعديلات هيستون. مغناطيسي