CST، 96708S، لوحة قياس التدفق الخلوي لعلامات الخلايا التائية الأساسية البشرية

مجموعة أدوات فحص لدراسة CD3epsilon/Granzyme B/CD8A/FOXP3/CD4 في مجال البحث. معلومات استخدام المنتج جميع الأجسام المضادة في هذه المجموعة متوافقة مع مجموعة تثبيت/نفاذية عامل النسخ FoxP3 رقم 43481، ويمكن استخدامها في مزيج تلوين واحد على الخلايا المثبتة والمنفذة. قبل التثبيت وحضانة الأجسام المضادة، نوصي بإضافة صبغة حيوية قابلة للتثبيت، مثل صبغة Ghost Dye Violet 510 Fixable Viability Dye، لتمكين تحديد الخلايا الميتة واستبعادها من التحليل. استراتيجية تحديد مجموعات الخلايا التائية الأساسية: في حال استخدام صبغة حيوية قابلة للتثبيت، يتم أولاً تحديد الخلايا الحية. ثم يتم تحديد الخلايا اللمفاوية بناءً على التشتت الأمامي والجانبي. الخلايا التائية المساعدة التقليدية هي خلايا CD3+CD4+ ضمن نطاق الخلايا اللمفاوية. الخلايا التائية التنظيمية CD3+CD4+ إيجابية لتعبير FoxP3. الخلايا التائية السامة التقليدية هي خلايا CD3+CD8+ ضمن نطاق الخلايا اللمفاوية. يمكن أن تكون كل من CD3+CD4+ وCD3+CD8+ إيجابية لتعبير جزيء Granzyme B السام. تخزين تُزوَّد الأجسام المضادة CD3 (UCHT1) أحادية النسيلة للفأر (مُقترنة بـ PE)، وCD4 (RPA-T4) أحادية النسيلة للفأر (مُقترنة بـ violetFluor™ 450)، وCD8α (RPA-T8) أحادية النسيلة للفأر (مُقترنة بـ PE-Cy7®) في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من NaH₂PO₄، و150 ملي مولار من NaCl، و0.09% من NaN₃، و0.1% من الجيلاتين، عند درجة حموضة 7.2. أما الأجسام المضادة FoxP3 (D6O8C) أحادية النسيلة للأرنب (مُقترنة بـ Alexa Fluor® 488) والأجسام المضادة Granzyme B (D2H2F) أحادية النسيلة للأرنب (مُقترنة بـ Alexa Fluor® 647) فتُزوَّد في محلول فوسفات ملحي (PBS) عند درجة حموضة 7.2، يحتوي على أقل من 0.1% من أزيد الصوديوم و2 ملغم/مل من ألبومين المصل البقري (BSA). يُحفظ في درجة حرارة 4 درجات مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. يُحفظ بعيدًا عن الضوء. لا يُجمد. جميع مكونات هذه المجموعة صالحة للاستخدام وفقًا للتاريخ المطبوع على ملصق العبوة الخارجية عند تخزينها في درجة الحرارة الموصى بها. يُرجى الرجوع إلى ملصقات المنتج أو بيانات المنتج أو صفحات الويب لمعرفة تواريخ "الأفضل قبل" المحددة لكل مكون على حدة. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ) النوعية / الحساسية يكشف كل جسم مضاد في لوحة قياس التدفق الخلوي لعلامات الخلايا التائية الأساسية البشرية عن المستويات الداخلية لبروتينه المستهدف. يكشف الجسم المضاد أحادي النسيلة للفأر CD3 (UCHT1) (المقترن بـ PE) عن جزء محدد من البروتين ضمن النطاق خارج الخلوي لبروتين CD3ε. ويكشف الجسم المضاد أحادي النسيلة للفأر CD4 (RPA-T4) (المقترن بـ violetFluor 450) والجسم المضاد أحادي النسيلة للفأر CD8 alpha (RPA-T8) (المقترن بـ PE-Cy7) عن جزء محدد من البروتين ضمن النطاق خارج الخلوي لبروتين CD3ε. التفاعل مع الأنواع: الإنسان المصدر / التنقية تم تنقية الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من سائل مزرعة الأنسجة باستخدام كروماتوغرافيا التقارب. ثم تم ربط الأجسام المضادة المنقاة في ظل ظروف مثالية، مع إزالة الصبغة غير المتفاعلة من المستحضر.