CST, 9733T, Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرانب

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة ثلاثي ميثيل الهيستون H3 (Lys27). مُعتمد للاستخدام في تقنيات WB، IHC، IF، F، ChIP، C&R، C&T. متوفر بثلاثة أحجام. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة عالي التخصص والمُعتمد داخليًا، والمُستخلص من الأرانب والمُوجه ضد ثلاثي ميثيل الهيستون H3 (Lys27) (C36B11) (CST #9733)، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج للحصول على أفضل نتائج في تقنيتي ChIP وChIP-seq، استخدم 10 ميكرولتر من الجسم المضاد و10 ميكروغرام من الكروماتين (ما يعادل تقريبًا 4 × 10⁶ خلية) لكل عملية ترسيب مناعي. تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد باستخدام مجموعات SimpleChIP® Enzymatic Chromatin IP. تم تحديد تخفيف CUT&RUN باستخدام مجموعة CUT&RUN Assay Kit رقم 86652. تم تحديد تخفيف CUT&Tag باستخدام مجموعة CUT&Tag Assay Kit رقم 77552. اللطخة الغربية: 1:1000 IHC Leica Bond: 1:200 - 1:800 الكيمياء المناعية النسيجية (البارافين): 1:100 - 1:400 التألق المناعي (الكيمياء المناعية الخلوية): 1:800 - 1:3200 قياس التدفق الخلوي (مثبت/منفذ): 1:100 - 1:400 كروماتين IP: 1:50 تسلسل الحمض النووي للكروماتين: 1:50 قطع وهروب: 1:50 قص ولصق: 1:50 تخزين يُباع في محلول يحتوي على 10 ملي مولار من هيبس الصوديوم (الأس الهيدروجيني 7.5)، و150 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و100 ميكروغرام/مل من ألبومين المصل البقري، و50% جلسرين، وأقل من 0.02% أزيد الصوديوم. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. للحصول على نسخة خالية من الحامل (خالية من ألبومين المصل البقري والأزيد)، يُرجى مراجعة المنتج رقم 35861. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن، التلوين المناعي النسيجي (باستخدام لايكا بوند)، التلوين المناعي النسيجي (باستخدام البارافين)، التألق المناعي (التلوين المناعي الخلوي)، قياس التدفق الخلوي (باستخدام عينات مثبتة/منفذة)، ترسيب الكروماتين المناعي، تسلسل ترسيب الكروماتين المناعي، تقنية CUT&RUN، تقنية CUT&Tag النوعية / الحساسية يكشف الجسم المضاد أحادي النسيلة للأرانب (C36B11) ثلاثي الميثيل-هيستون H3 (Lys27) عن المستويات الذاتية للهيستون H3 فقط عند وجود ثلاث مجموعات ميثيل على Lys27. لا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع Lys27 غير الميثيلي، أو أحادي الميثيل، أو ثنائي الميثيل. بالإضافة إلى ذلك، لا يتفاعل هذا الجسم المضاد مع الهيستون H3 أحادي الميثيل، أو ثنائي الميثيل، أو ثلاثي الميثيل عند Lys4، أو Lys9، أو Lys36، أو مع الهيستون H4 عند Lys20. التفاعل مع الأنواع: الإنسان، الفأر، الجرذ، القرد المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات بببتيد اصطناعي يتوافق مع الطرف الأميني للهيستون H3 الذي يتم فيه مثيلة Lys27 ثلاثياً. خلفية يُعدّ النيوكليوسوم، المُكوّن من أربعة بروتينات هيستون أساسية (H2A، H2B، H3، وH4)، الوحدة البنائية الرئيسية للكروماتين. كان يُعتقد سابقًا أن الهيستونات تعمل كدعامة ثابتة لتعبئة الحمض النووي، ولكن تبيّن الآن أنها بروتينات ديناميكية تخضع لأنواع متعددة من التعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الأسيتلة، والفسفرة، والمثيلة، واليوبيكويتين (1). تُعدّ مثيلة الهيستون عاملًا رئيسيًا في تحديد المناطق النشطة وغير النشطة في الجينوم، وهي ضرورية لبرمجة الجينوم بشكل صحيح أثناء النمو (2، 3). تعزز مثيلة الأرجينين في الهيستونات H3 (Arg2، 17، 26) وH4 (Arg3) تنشيط النسخ، وتتوسط هذه العملية عائلة من إنزيمات مثيلة الأرجينين البروتينية (PRMTs)، بما في ذلك المُنشطات المُساعدة PRMT1 وCARM1 (PRMT4) (4). في المقابل، تم تحديد مجموعة أكثر تنوعًا من إنزيمات ميثيل ترانسفيراز الليسين في الهيستونات، تحتوي جميعها باستثناء واحد على نطاق SET تحفيزي محفوظ، تم تحديده في الأصل في بروتينات Su(var)3-9، وEnhancer of zeste، وTrithorax. تحدث مثيلة الليسين بشكل أساسي على الهيستونات H3 (Lys4، 9، 27، 36، 79) وH4 (Lys20)، وقد ثبت تورطها في كل من تنشيط وتثبيط النسخ (4). تنسق مثيلة بقايا الليسين هذه استقطاب إنزيمات تعديل الكروماتين التي تحتوي على وحدات ربط ميثيل الليسين، مثل نطاقات الكرومودومين (HP1، PRC1)، وأصابع PHD (BPTF، ING2)، ونطاقات تيودور (53BP1)، ونطاقات WD-40 (WDR5) (5-8). أظهر اكتشاف إنزيمات إزالة مثيلة الهيستون، مثل PADI4 و LSD1 و JMJD1 و JMJD2 و JHDM1، أن المثيلة هي علامة فوق جينية قابلة للعكس (9). أسماء بديلة H3؛ الهيستون المتجمع H3 1؛ عائلة الهيستون H3، العضو A؛ H3/A؛ H31؛ H3C1؛ H3C10؛ H3C11؛ H3C12؛ H3C2؛ H3C3؛ H3C4؛ H3C6؛ H3C7؛ H3C8؛ H3FA؛ H3FB؛ H3FC؛ H3FC HIST1H3C؛ H3FD؛ H3FF؛ H3FH؛ H3FI؛ H3FJ؛ H3FK؛ H3FL؛ HIST1H3A؛ HIST1H3B؛ HIST1H3C؛ HIST1H3D؛ HIST1H3E؛ HIST1H3F؛ HIST1H3G؛ HIST1H3H؛ HIST1H3I؛ HIST1H3J؛ الهيستون 1، H3a؛ مجموعة الهيستون 1، العضو A من عائلة H3؛ مجموعة الهيستون 1، H3a؛ الهيستون H3؛ الهيستون H3.1؛ الهيستون H3/a؛ الهيستون H3/b؛ الهيستون H3/c؛ الهيستون H3/d؛ الهيستون H3/f؛ الهيستون H3/h؛ الهيستون H3/i؛ الهيستون H3/j؛ الهيستون H3/k؛ الهيستون H3/l مواصفة التفاعل: HMR Mk الحساسية: داخلية المنشأ الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 17 المصدر/النمط المصلي: IgG الأرنب