CST، 97982S، Cas9 (7A9-3A3) الجسم المضاد أحادي النسيلة للماوس (HRP المترافق)

جسم مضاد أحادي النسيلة لدراسة بكتيريا Cas9. مُعتمد للاستخدام في تقنية Western Blotting. يتميز هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة Cas9 (7A9-3A3) المُستخلص من الفئران (المُقترن بإنزيم بيروكسيداز الفجل) (رقم CST #97982) بدقة عالية وخضع لاختبارات داخلية صارمة، وهو جاهز للشحن. معلومات استخدام المنتج اللطخة الغربية: 1:1000 تخزين يُزوَّد المنتج بمحلول يحتوي على 136 ملي مولار من كلوريد الصوديوم، و2.6 ملي مولار من كلوريد البوتاسيوم، و12 ملي مولار من فوسفات الصوديوم ثنائي القاعدة (الأس الهيدروجيني 7.4)، و2 ملغ/مل من ألبومين المصل البقري، و50% من الجلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. لا تُقسِّم الأجسام المضادة إلى أجزاء. بروتوكول البروتوكولات المتاحة: لطخة ويسترن النوعية / الحساسية يتعرف الجسم المضاد أحادي النسيلة Cas9 (7A9-3A3) للفأر (المقترن بـ HRP) على مستويات بروتين Cas9 الكلي المنقولة. التفاعل مع الأنواع: من المتوقع أن يتفاعل مع جميع الأنواع المصدر / التنقية يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق تحصين الحيوانات ببروتين مُعاد التركيب خاص بالنهاية الأمينية لبروتين Cas9. يتعرف هذا الجسم المضاد على الأحماض الأمينية المحيطة بالحمض الأميني أرجينين 220 في بروتين Cas9. خلفية يُعدّ البروتين المرتبط بتقنية كريسبر 9 (Cas9) نوكليازًا للحمض النووي موجهًا بواسطة الحمض النووي الريبي، وهو جزء من نظام المناعة المضادة للفيروسات كريسبر الذي يوفر مناعة تكيفية ضد المادة الوراثية خارج الكروموسومات (1). تتضمن آلية عمل كريسبر المضادة للفيروسات ثلاث خطوات: (أ) اكتساب البكتيريا المضيفة للحمض النووي الغريب؛ (ب) تخليق ونضج الحمض النووي الريبي لكريسبر (crRNA) متبوعًا بتكوين معقدات بروتين نوكلياز الحمض النووي الريبي-كاس؛ (ج) تثبيط الهدف من خلال تعرف المعقد على الحمض النووي الغريب وقطعه بواسطة نشاط نوكلياز كاس (2). يوفر نظام المناعة المضادة للفيروسات من النوع الثاني كريسبر/كاس أداة فعالة لتحرير الجينوم بدقة، وله إمكانات لتنظيم جينات محددة وتطبيقات علاجية (3). يجب إدخال بروتين Cas9 وحمض نووي ريبي موجه يتكون من اندماج بين crRNA و crRNA منشط للنسخ (tracrRNA) في الخلية أو التعبير عنهما فيها. يُوجّه تسلسلٌ من 20 نيوكليوتيدًا في الطرف 5' من الحمض النووي الريبوزي الدليلي إنزيم Cas9 إلى موقعٍ مُستهدفٍ مُحددٍ في الحمض النووي. ونتيجةً لذلك، يُمكن "برمجة" Cas9 لقطع مواقع مُختلفةٍ في الحمض النووي داخل الخلايا والكائنات الحية. وقد استُخدمت أدوات تحرير الجينوم CRISPR/Cas9 في العديد من الكائنات الحية، بما في ذلك خلايا الفئران والبشر (4، 5). تُشير الدراسات البحثية إلى إمكانية استخدام CRISPR لتوليد أليلاتٍ طافرةٍ أو جيناتٍ مُبلِّغةٍ في الخلايا الجذعية الجنينية للقوارض والرئيسيات (6-8). أسماء بديلة cas9؛ إنزيم نووي داخلي مرتبط بتقنية كريسبر Cas9/Csn1؛ csn1 مواصفة التفاعل: الكل الحساسية: للخلايا المنقولة فقط الوزن الجزيئي (كيلودالتون): 160 المصدر/النمط المصلي: IgG1 الفأري