ميرك، 71205-3CN، بنزوناز® نوكلياز HC، نقاء > 90%

إنزيم بنزوناز® نوكلياز هو إنزيم نوكلياز داخلي مُهندس وراثيًا من بكتيريا Serratia marcescens. يُحلل هذا الإنزيم جميع أشكال الحمض النووي DNA والحمض النووي الريبوزي RNA (أحادي السلسلة، مزدوج السلسلة، خطي، ودائري) دون أن يكون له أي نشاط بروتيني. يتميز بفعاليته في نطاق واسع من الظروف، ويتمتع بنشاط نوعي عالٍ للغاية. يقوم الإنزيم بهضم الأحماض النووية بشكل كامل إلى قليل النوكليوتيدات ذات نهايات أحادية الفوسفات في الطرف 5′، ويتراوح طولها بين 2 و5 قواعد (أقل من حد التهجين)، مما يجعله مثاليًا لإزالة الأحماض النووية من البروتينات المُعاد تركيبها، وبالتالي الامتثال لإرشادات إدارة الغذاء والدواء الأمريكية (FDA) بشأن تلوث الأحماض النووية. إن قدرة بنزوناز على التحلل المائي السريع للأحماض النووية تجعله خيارًا ممتازًا لتقليل اللزوجة، مما يُقلل وقت المعالجة ويزيد من إنتاجية البروتين. على سبيل المثال، يتوافق هذا الإنزيم مع كواشف استخلاص البروتين BugBuster® وPopCulture®، وبالتالي يمكن إضافته مع هذه الكواشف لإزالة اللزوجة والأحماض النووية من مستخلصات الإشريكية القولونية. يتكون الإنزيم من وحدتين فرعيتين، وزن كل منهما 30 كيلو دالتون. وهو فعال عند درجة حموضة تتراوح بين 6 و10، ودرجة حرارة تتراوح بين 0 و42 درجة مئوية، ويتطلب 1-2 ملي مول من أيونات المغنيسيوم (Mg²⁺) للتنشيط. كما أنه نشط في وجود المنظفات الأيونية وغير الأيونية، وعوامل الاختزال، ومثبط البروتياز PMSF (بتركيز 1 ملي مول)، ومركب EDTA (بتركيز 1 ملي مول)، واليوريا (تعتمد فعاليته النسبية على الظروف المحددة). ويُثبط نشاطه بوجود تركيزات أعلى من 150 ملي مول من الكاتيونات أحادية التكافؤ، أو الفوسفات، أو كبريتات الأمونيوم، أو هيدروكلوريد الغوانيدين، أو بتركيزات أعلى من 100 ملي مول. يتوفر إنزيم بنزوناز نوكلياز بدرجتي نقاء فائقة (> 99% وفقًا لتقنية SDS-PAGE) ونقية (> 90%)، بتركيز قياسي يتراوح بين 25 و29 وحدة/ميكرولتر، وبتركيز عالٍ (HC) يبلغ 250 وحدة/ميكرولتر. كلا المستحضرين خاليان من أي بروتياز قابل للكشف، ويتميزان بنشاط نوعي يزيد عن 1 × 10⁶ وحدة/ملغ بروتين. تم اختبار درجة النقاء التي تزيد عن 99% للكشف عن السموم الداخلية، وتحتوي على أقل من 0.25 وحدة سمية داخلية/1000 وحدة. يُقدم المنتج على شكل محلول مُرشح عبر مرشح 0.2 ميكرومتر في 50% جلسرين. يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية. إجمالي السموم الداخلية: 90% وفقًا لتقنية SDS-PAGE.