ميرك، S7803، CpG WIZ™ MGMT - فحص تفاعل البوليميراز المتسلسل الخاص بالمثيلة

من المعروف أن مثيلة السيتوزينات الواقعة في الطرف 5′ للغوانوزين تؤثر بشكل كبير على التعبير الجيني للعديد من الجينات حقيقية النواة (بيرد، 1992). في الخلايا الطبيعية، تحدث المثيلة بشكل رئيسي في المناطق الفقيرة بـ CG، بينما تبقى المناطق الغنية بـ CG، والتي تُسمى جزر CpG، غير مثيلة. وقد وُثِّقت المثيلة الشاذة لجزر CpG غير المثيلة عادةً كحدث متكرر نسبيًا في الخلايا الخالدة والمتحولة (أنتيكيرا، 1990)، وارتبطت بتعطيل النسخ لجينات كابتة للأورام محددة في السرطانات البشرية (ميرلو، 1995). يُعد إنزيم ناقل ميثيل غوانين O(6)- (MGMT) مثالًا على جين يُظهر فرط مثيلة مميز. يُعد تفاعل البوليميراز المتسلسل الخاص بالمثيلة (MSP) تقنية حديثة للكشف الحساس عن مثيلة الجينات غير الطبيعية باستخدام كميات صغيرة من الحمض النووي (هيرمان، 1996). تستخدم هذه العملية تفاعل البيسلفيت الأولي لتعديل الحمض النووي، يليه تضخيم PCR باستخدام بادئات محددة مصممة للتمييز بين الحمض النووي الميثيلي وغير الميثيلي.