نيو إنجلاند بيولابس، B7703S، صبغة تحميل البروتين الزرقاء

تحتوي عبوة صبغة تحميل البروتين الزرقاء على قارورة واحدة من محلول التحميل الأزرق وقارورة واحدة من عامل الاختزال بتركيز 30X. يُعدّ هذا المحلول المُركّب مثاليًا لتطبيقات هلام البروتين. الفئات ذات الصلة: أدوات البروتين، المحاليل المنظمة والمخففة، محاليل تحميل الهلام، معايير البروتين، الأسئلة الشائعة: س: ما الذي يأتي مع عبوة محلول التحميل الأزرق؟ ج: تحتوي العبوة على 8 مل من محلول التحميل الأزرق بتركيز 3X و1 مل من محلول DTT بتركيز 30X (1.25 مولار). س: ما هو تركيب محلول التحميل الأزرق؟ ج: محلول التحميل الأزرق بتركيز 1X: 62.5 ملي مولار من Tris-HCl (الأس الهيدروجيني 6.8 عند 25 درجة مئوية)، 2% (وزن/حجم) من SDS، 10% جلسرين، و0.01% (وزن/حجم) من بروموفينول الأزرق. س: كيف يُستخدم محلول التحميل الأزرق؟ ج: 1. أضف 1/10 حجم من محلول DTT بتركيز 30X إلى حجم واحد من محلول التحميل الأزرق بتركيز 3X. ٢. أضف نصف حجم المزيج المذكور أعلاه إلى عينة البروتين. ٣. سخّن عند ١٠٠ درجة مئوية لمدة ٥ دقائق لتفكيك البروتين. ٤. افصل العينة بالطرد المركزي لمدة ٣٠ ثانية في جهاز طرد مركزي دقيق لإزالة المواد المترسبة. ٥. ضع العينة على الهلام. س: ما الفرق بين محاليل التحميل الحمراء والزرقاء؟ ج: الفرق الوحيد هو الصبغة. تم اختيار اللون الأحمر للعلامات الملونة مسبقًا لأن الصبغة الزرقاء قد تُشتبه كحزمة بروتينية إضافية. س: ما وظائف مكونات عبوة المحلول المنظم؟ ج: يوجد ثنائي ثيوثريتول (DTT) للمساعدة في تقليل أي روابط ثنائية الكبريتيد (SS) التي تساعد في تكوين البنية الثانوية/الثالثية و/أو تكوين ثنائيات. يرتبط منظف كبريتات دوديسيل الصوديوم (SDS) بالشحنات الموجبة للبروتينات بحيث يتم فصل البروتينات بناءً على الحجم وليس الشحنة. كما يعمل SDS على تفكيك البروتينات والوحدات الفرعية للمساعدة في فصلها بناءً على الحجم وليس الشكل.