Product Description
الفئات ذات الصلة: تطبيقات التضخيم متساوي الحرارة وإزاحة السلسلة، تضخيم الجينوم الكامل، الأسئلة الشائعة حول التضخيم متساوي الحرارة: س: كيف يمكنني زيادة إنتاجية تضخيم الجينوم الكامل عند استخدام مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604)؟ ج: يمكن الحصول على إنتاجية أعلى لمنتج تضخيم الجينوم الكامل عن طريق زيادة حجم التفاعل، أو زيادة وقت الحضانة، أو زيادة كمية الحمض النووي المدخل. يرجى ملاحظة أن زيادة وقت الحضانة قد تؤدي إلى زيادة تضخيم المنتجات غير المحددة في حالة عدم وجود قالب. س: ما هو نطاق درجة الحرارة المناسب لاستخدام مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604)؟ ج: يتراوح نطاق درجة حرارة التفاعل الأمثل بين 40 و42 درجة مئوية. لا يُنصح بالتضخيم باستخدام هذه المجموعة عند درجات حرارة أقل من 37 درجة مئوية أو أعلى من 43 درجة مئوية. س: ما الفرق بين مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604) ومجموعة phi29-XT RCA (NEB #E1603)؟ ج: إن إنزيم بوليميراز الحمض النووي phi29-XT فعال في تضخيم الحمض النووي الدائري بتقنية تضخيم الدائرة المتدحرجة (RCA)، وكذلك الحمض النووي الجينومي بتقنية تضخيم الإزاحة المتعددة (MDA). مع ذلك، صُمم إنزيم بوليميراز phi29-XT الموجود في مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604) لتقليل التحيز في نسبة GC أثناء تضخيم الحمض النووي الجينومي البشري. بالنسبة لتقنية RCA، نقترح استخدام مجموعة phi29-XT RCA (NEB #E1603). س: هل مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604) مناسبة لتضخيم أجزاء الحمض النووي القصيرة؟ ج: تستخدم مجموعة phi29-XT WGA تقنية تضخيم الإزاحة المتعددة (MDA)، وهي أنسب لقطع الحمض النووي الطويلة، حيث تقل كفاءة التضخيم مع انخفاض طول قالب المادة الأولية. س: هل أحتاج إلى تنقية منتجات WGA قبل استخدامها في التطبيقات اللاحقة عند استخدام مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604)؟ ج: عادةً، يمكن استخدام منتجات WGA مباشرةً في التطبيقات اللاحقة دون تنقية. تتطلب العديد من التطبيقات اللاحقة تخفيف منتجات WGA فقط قبل الاستخدام. في حال لزم التنقية، يمكن استخدام خرز SPRI® بتركيز 0.6X لتنقية منتجات WGA، وفقًا لتوصيات الشركة المصنعة. س: كيف يمكنني تحديد كمية منتجات WGA الناتجة باستخدام مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604)؟ ج: يمكن قياس كمية منتجات تضخيم الجينوم الكامل (WGA) مباشرةً باستخدام مجموعة Quant-iT® PicoGreen® dsDNA Assay Kit أو باستخدام مقياس التألق Qubit® بعد التخفيف إلى نطاق الكشف المناسب. بدلاً من ذلك، يمكن قياس كمية منتجات WGA المنقاة عن طريق قياس الامتصاص عند 260 نانومتر أو باستخدام جهاز NanoDrop®. س: عند استخدام مجموعة phi29-XT WGA Kit (NEB #E1604)، هل يمكن زيادة حجم التفاعل أو تقليله؟ ج: نعم، يمكن تقليل حجم التفاعل إلى 10 ميكرولتر وزيادته إلى 50 ميكرولتر من الحجم الموصى به وهو 20 ميكرولتر. قد يكون من الممكن زيادة الحجم أكثر من ذلك، ولكن لم يتم اختباره. س: هل مجموعة phi29-XT WGA Kit (NEB #E1604) مناسبة لتضخيم الحمض النووي للخلايا المفردة؟ ج: نعم، يوصى باستخدام مجموعة phi29-XT WGA Kit لتضخيم الحمض النووي للخلايا المفردة. بالنسبة للخلايا ذات الجدران الخلوية السميكة (مثل الخلايا النباتية)، قد يكون تحلل الخلايا ضروريًا لتحرير الحمض النووي قبل خطوة التمسخ. س: هل أحتاج إلى استخلاص الحمض النووي من الخلايا الكاملة قبل استخدام مجموعة phi29-XT WGA (NEB #E1604)؟ ج: بالنسبة للخلايا التي تتحلل بسهولة، فإن خطوة تمسخ الحمض النووي المضمنة في بروتوكول مجموعة phi29-XT WGA كافية. أما بالنسبة للخلايا التي يصعب تحللها، فقد يكون استخلاص الحمض النووي مفيدًا. يمكن استخدام مجموعة Monarch® Spin gDNA Extraction Kit (NEB #T3010) لاستخلاص الحمض النووي من مجموعة واسعة من أنواع العينات، مثل الخلايا والدم والأنسجة والبكتيريا والخميرة واللعاب والمسحات.
Order Guidelines
1. Price & Stock Available on Request. Click to send email to: service@iright.com
2. Please DO NOT make payment before confirmation.
3. Minimum order value of $1,000 USD required.
Collaboration
Tony Tang
Email: Tony.Tang@iright.com
Mobile/WhatsApp/Wechat: +86-17717886924