نيو إنجلاند بيولابس، M0261L، بوليميراز الحمض النووي ثيرميناتور™

إنزيم ثيرميناتور دي إن إيه بوليميراز هو نوع مُعدّل من إنزيم 9°N™ دي إن إيه بوليميراز، يتميز بقدرة مُحسّنة على دمج ركائز مُعدّلة مثل ثنائي ديوكسي نيوكليوتيدات، وريبونوكليوتيدات، وأسيكلونيوكليوتيدات (1،2). التصنيفات ذات الصلة : مواصفات وسم الحمض النووي، تعريف الوحدة: تُعرّف الوحدة الواحدة بأنها كمية الإنزيم التي تُدمج 10 نانومول من دي إن تي بي في مادة غير قابلة للذوبان في الأحماض خلال 30 دقيقة عند درجة حرارة 75 درجة مئوية. شروط التفاعل: محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، 20 ملي مولار Tris-HCl، 10 ملي مولار (NH4)2SO4، 10 ملي مولار KCl، 2 ملي مولار MgSO4، 0.1% Triton® X-100 (الأس الهيدروجيني 8.8 عند 25 درجة مئوية). محلول التخزين: 10 ملي مولار Tris-HCl، 100 ملي مولار KCl، 1 ملي مولار DTT، 0.1 ملي مولار EDTA، 50% جلسرين، الأس الهيدروجيني 7.4 عند 25 درجة مئوية. التثبيط الحراري : لا. الوزن الجزيئي النظري: 90000 دالتون. إكسونوكلياز 5' - 3': لا. إكسونوكلياز 3' - 5': لا. إزاحة السلسلة +. شروط فحص الوحدة: محلول تفاعل ThermoPol® بتركيز 1X، 200 ميكرومولار dNTPs بما في ذلك [3H]-dTTP و15 نانومولار من البادئ. M13mp18 أحادي السلسلة. الأسئلة الشائعة: س: هل يمكن استخدام بوليميراز الحمض النووي Therminator™ في محاليل منظمة أخرى؟ ج: لا يُنصح باستبدال المحاليل المنظمة. س: متى يجب استخدام بوليميراز الحمض النووي Therminator™؟ ج: عند الحاجة إلى دمج نيوكليوتيدات معدلة مثل ثنائي ديوكسي نيوكليوتيدات، وريبونوكليوتيدات، وأسيكلونيوكليوتيدات. س: هل يمكن استبدال إنزيم ThermoSequenase™ بإنزيم Therminator™؟ ج: نعم، كلاهما يدمج نيوكليوتيدات معدلة. بالنسبة للمختبرات التي تتطلب كميات كبيرة من البوليميراز، قد يؤدي استخدام بوليميراز الحمض النووي Therminator إلى توفير كبير في التكاليف. قد يتطلب الأمر تحسين تفاعل بوليميراز الحمض النووي Therminator لتطبيقات مختلفة. س: هل يمكن استخدام بوليميراز الحمض النووي Therminator™ للتسلسل؟ ج: يمكن استخدام بوليميراز الحمض النووي Therminator للتسلسل، ولكن قد يتطلب الأمر تحسينًا وترخيصًا. استخدام مزيج النيوكليوتيدات القياسي من ABI يعطي نتائج أقل من المثالية. س: لماذا تكون بعض قواعد الأدينين (A) في تسلسلي ضعيفة عند استخدام بوليميراز الحمض النووي Therminator™؟ ج: في ظل ظروف التسلسل التي تم اختبارها، تعطي قواعد الأدينين (A) التي تلي قواعد السيتوزين (C) إشارة ضعيفة باستمرار.